Differential diagnosis of Taenia saginata and Taenia saginata asiatica taeniasis through PCR

González, Luís Miguel; Montero, Estrella; Morakote, Nimit; Puente, Sabino; Tuesta, Jose Luis Díaz De; Serra, T.; López‐Vélez, Rogelio; McManus, Donald P.; Harrison, L.J.S.; Parkhouse, R. M. E.; Gárate, Teresa

doi:10.1016/j.diagmicrobio.2004.03.013

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“…DNA-based differentiation of T. solium and T. saginata has been described and includes the use of probes (4,6,15), PCR with species-specific primers (13,14,31), and PCR followed by restriction enzyme analysis (PCR-REA) (21,26,32). However, these methods require pure parasite DNA, which means that the DNA has to be extracted from a single proglottid and adequately cleaned, because these primers may amplify any eukaryotic DNA, causing cross-amplification.…”

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confidence: 99%

Nested PCR for Specific Diagnosis of Taenia solium Taeniasis

et al. 2008

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Taeniasis due to Taenia solium is a disease with important public health consequences, since the larval stage is not exclusive to the animal intermediate, the pig, but also infects humans, causing neurocysticercosis. Early diagnosis and treatment of T. solium tapeworm carriers is important to prevent human cysticercosis. Current diagnosis based on microscopic observation of eggs lacks both sensitivity and specificity. In the present study, a nested-PCR assay targeting the Tso31 gene was developed for the specific diagnosis of taeniasis due to T. solium. Initial specificity and sensitivity testing was performed using stored known T. solium-positive and -negative samples. The assay was further analyzed under field conditions by conducting a case-control study of pretreatment stool samples collected from a population in an area of endemicity. Using the archived samples, the assay showed 97% (31/32) sensitivity and 100% (123/123) specificity. Under field conditions, the assay had 100% sensitivity and specificity using microscopy/enzyme-linked immunosorbent assay coproantigen testing as the gold standards. The Tso31 nested PCR described here might be a useful tool for the early diagnosis and prevention of taeniasis/cysticercosis.

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Nested PCR for Specific Diagnosis of Taenia solium Taeniasis

et al. 2008

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“…Dos trabalhos revisados, somente nos de GONZÁLEZ et al (2000) (2000), obtiveram fragmentos gênicos com o mesmo padrão de amplificação. Considerando-se a necessidade de diferenciação espécie-específica entre T. saginata e T. solium, a aplicação dos primers utilizados no presente ensaio de duplex-PCR, quanto à especificidade, apresenta resultados superiores aos da reação de multiplex-PCR descrita por GONZÁLEZ et al (2000), pelo fato de amplificar fragmentos únicos e distintos. Os primers desenvolvidos por GONZÁLEZ et al (2000), quando aplicados na PCR com a presença do DNA de T. saginata amplificam dois fragmentos gênicos, de 600pb e 170pb, e, quando na presença do DNA de T. solium, amplificam um fragmento de 170pb, idêntico, portanto, a um dos fragmentos obtidos para T. saginata.…”

Section: Resultsunclassified

“…Considerando-se a necessidade de diferenciação espécie-específica entre T. saginata e T. solium, a aplicação dos primers utilizados no presente ensaio de duplex-PCR, quanto à especificidade, apresenta resultados superiores aos da reação de multiplex-PCR descrita por GONZÁLEZ et al (2000), pelo fato de amplificar fragmentos únicos e distintos. Os primers desenvolvidos por GONZÁLEZ et al (2000), quando aplicados na PCR com a presença do DNA de T. saginata amplificam dois fragmentos gênicos, de 600pb e 170pb, e, quando na presença do DNA de T. solium, amplificam um fragmento de 170pb, idêntico, portanto, a um dos fragmentos obtidos para T. saginata. Esse padrão de amplificação pode dificultar a interpretação dos resultados sempre que houver a possibilidade da presença simultânea do DNA das duas espécies na amostra a ser testada, como naquelas provenientes de efluentes sanitários ou, ainda, pela contaminação acidental de DNA entre amostras no laboratório.…”

Section: Resultsunclassified

“…GOTTSTEIN & MOWATT (1991); GOTTSTEIN et al (1991) (GONZÁLEZ et al, 2000;MONTERO et al, 2003;NUNES et al, 2003) já foi reportada. Entretanto, para o diagnóstico espécie-específico de T. saginata e/ou T. solium, os ensaios descritos e publicados até o momento requerem duas ou mais etapas de reações para que os níveis de especificidade e sensibilidade sejam satisfatórios e resultados conclusivos sejam alcançados.…”

Section: Introductionunclassified

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Diferenciação específica entre Taenia saginata e Taenia solium por ensaio de PCR e duplex-PCR

et al. 2006

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RESUMO Este estudo teve como objetivo a padronização de protocolos e a seleção de novos primers para a identificação espécie-específica de as well as T. solium specific primers and were selected from different semiconserved regions. The selected sequences were examined in for similarities with other organisms through the GenBank Blast procedure and experimentally by PCR using total DNA (tDNA)

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“…Além do apoio anatomopatológico, o uso da técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR), a partir de primers espécie-especíϐicos, torna possível a identiϐicação rápida e especíϐica de cestóides (González et al 2000), tendo aplicação potencial no diagnóstico e na diferenciação entre as tênias humanas.…”

Section: Introductionunclassified

Caracterização das lesões por Cysticercus bovis, na inspeção post mortem de bovinos, pelos exames macroscópico, histopatológico e pela reação em cadeia da polimerase (PCR)

Costa

Santos²,

Santana

et al. 2012

Pesq. Vet. Bras.

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Considerando a necessidade do conhecimento da cisticercose bovina e do aperfeiçoamento dos métodos de diagnóstico desta doença, objetivou-se verificar a ocorrência do Cysticercus bovis nos diversos locais anatômicos, tais como: cabeça, coração, esôfago, diafragma, língua, fígado e carcaça, examinados pelo Serviço de Inspeção Federal. O diagnóstico foi feito por macroscopia, microscopia e PCR com extração de DNA por fervura para a identificação do metacestóide. Dos 22043 bovinos abatidos, 713 (3,23%) estavam infectados. O coração foi o sítio anatômico mais afetado, com 1,90% (420/22043), seguido da cabeça, 1,11% (245/22043), do esôfago, 0,08% (18/22043), da carcaça, 0,07% (15/22043), do diafragma, 0,03% (7/22043), do fígado, 0,02% (5/22043) e da língua, 0,01% (3/22043). Dos cistos obtidos, 58,35% (416/713) estavam mortos e 41,65% (297/713), vivos. As diferenças entre os sítios anatômicos e a condição morfológica dos cistos foram significativas (p < 0,05). Dos 416 cistos mortos, 253 foram examinados por apresentarem características de: lesões nodulares firmes, brancacentas, com material amarelado, por vezes com aspecto calcário, no interior. O exame microscópico revelou granulomas comumente representados por centro necrótico e/ou mineralizado, envolto por histiócitos dispostos em paliçada, células gigantes multinucleadas, infiltrado misto, predominantemente de mononucleares, e fibrose. Por vezes, a periferia das lesões tinha características de tecido de granulação e mineralização em forma de lâminas lineares. Os restos parasitários foram identificados como um material hialino acelular, contendo elementos ovais e circulares, basofílicos, acidófilos e incolores, denominados corpúsculos calcários. Em algumas lesões foram observados raros corpúsculos, dispersos na reação inflamatória. Nódulos fibrosos, ricos em infiltrado linfóide ou crônico ativos, foram frequentemente visualizados. Dos cistos vivos examinados, 65% (13/20) foram positivos para C. bovis , confirmando o diagnóstico ambulatorial e a eficácia do método de PCR utilizado. Em virtude da positividade observada para C. bovis nos exames histopatológico e PCR, particularmente em fígado e esôfago, sugere-se que seja reformulado o artigo 176 do Regulamento de Inspeção Industrial e Sanitária de Produtos de Origem Animal, incluindo estes locais na rotina de inspeção nos matadouros.

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Differential diagnosis of Taenia saginata and Taenia saginata asiatica taeniasis through PCR

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Nested PCR for Specific Diagnosis of Taenia solium Taeniasis

Nested PCR for Specific Diagnosis of Taenia solium Taeniasis

Diferenciação específica entre Taenia saginata e Taenia solium por ensaio de PCR e duplex-PCR

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