Dna-Viral Infections: Baculoviridae

Tañada, Y.

doi:10.1016/b978-0-08-092625-4.50010-8

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“…As lagartas de S. frugiperda infectadas pelo baculovírus caracterizaram-se por apresentar manchas amarelas no corpo, lenta perda de apetite e oleosidade na epiderme. Num estágio mais avançado da doença, a epiderme torna-se frágil, rompendo-se com facilidade e havendo liberação de um fluido leitoso, com milhares de poliedros do VPN e tendência de lagartas infectadas procurarem o ponto mais alto disponível, um fenômeno comum a vários VPNs (Tanada & Kaya 1993).…”

Section: Resultsunclassified

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Identificação e caracterização de isolado brasileiro do vírus de poliedrose nuclear da lagarta do cartucho-do-milho

Gerk¹,

Kitajima

Souza

1997

An. Soc. Entomol. Bras.

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An. Soc. Entomol. Brasil 26(3): 507-515 (1997) Identification and Characterization of a Brazilian Isolate of Fall Armyworm Nuclear Polyhedrosis Virus ABSTRACT -A nuclear polyhedrosis virus (NPV) from Spodoptera frugiperda (Smith) caterpillars (Lepidoptera: Noctuidae), collected from diseased insects in Sete Lagoas, MG, was confirmed and identified. The pathology of infected caterpillars is characteristic of NPV. The virus showed tropism by ectoderm cells, fat cells, and tracheocytes. Viral particles (polyhedra and alkali released virions -ARVs) were purified through diferential centrifugations in sucrose gradient, and the polyhedral band was located in the inferior third part of the tube. Increasing time of polyhedral digestion with alkaline solution resulted in higher dissolution of occluded bodies (polyhedra) consequently releasing virions. Five bands were formed for the alkali released virions. The electrophoretic pattern of S. frugiperda NPV was compared to the one of Anticarsia gemmatalis (Hübner) NPV for polyhedra as well as ARVs. A peptide of 32,000 dalton was characterized as the polyhedrin of S. frugiperda NPV.

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Section: Resultsunclassified

“…1a,b,c,d;2a,b). As características apresentadas pelas células infectadas e os tecidos onde ocorreu a proliferação das partículas virais estão de acordo com o padrão de infecção e com os tropismos por tecidos apresentados pelos VPNs (Federici 1993, Tanada & Kaya 1993.…”

Section: Resultsunclassified

Identificação e caracterização de isolado brasileiro do vírus de poliedrose nuclear da lagarta do cartucho-do-milho

Gerk¹,

Kitajima

Souza

1997

An. Soc. Entomol. Bras.

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“…The polyhedral structure of different NPV of Lepidoptera is formed basically by the same constituents: virions, protein matrix of poliedrin, and viral envelope (Tanada & Kaya 1993, Blissard 1996, Brancalhão 2002. So, the technique 3 applied for BmMNPV polyhedron of B. mori, besides being simpler and fast, makes possible a morphologic identifi cation reliable, and can be applied for other NPVs, needing new tests to verify his applicability.…”

Section: Resultsmentioning

confidence: 99%

Nucleopolyhedrovirus: scanning electron microscopy technique

Torquato¹,

Neto²,

Brancalhão³

et al. 2006

Neotrop. Entomol.

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Neotropical Entomology 35(6):787-790 (2006) Nucleopolyhedrovirus: Técnica de Microscopia Eletrônica de Varredura RESUMO -Um método simples foi desenvolvido para se estudar a forma geométrica do Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus múltiplo, BmMNPV, para microscopia eletrônica de varredura. O vírus, pertencente à Família Baculoviridae, foi obtido do fi ltrado, do inóculo e da hemolinfa de lagartas de Bombyx mori (L.) (Lepidoptera: Bombycidae) infectadas. O material foi colocado diretamente sobre o suporte de varredura, onde previamente foi aderida uma fi ta de cobre. Após secagem e metalização com carbono e ouro, o vírus foi analisado ao microscópio de varredura. Os poliedros apresentaramse com as faces lisas, perfeitamente defi nidas, possibilitando a análise matemática que o identifi cou como um octaedro truncado. A forma do poliedro pode apresentar valor taxonômico, uma vez que ela é específi ca para cada linhagem viral. PALAVRAS-CHAVE: Baculovírus, Bombyx mori, BmMNPV, poliedro, octaedro truncado ABSTRACT -A simplifi ed methodology was developed to study the geometric form of multiple Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus by scanning electron microscopy. The virus belongs to Baculoviridae family and was isolated from the silkworm Bombyx mori (L.) (Lepidoptera: Bombycidae). The polyhedra of Nucleopolyhedrovirus were obtained from the fi ltrate, inoculum and hemolymph of the silkworm experimentally infected with nuclear polyhedra. This material was placed on stubs, where a copper tape was previously adhered. After dry at room temperature the virus was covered with carbon and gold. Scanning electron microscopy analysis reveled a well defi ned morphology for the polyhedra of multiple Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus, making possible the mathematical study that identifi ed it as a truncated octahedron. The form of the polyhedron can present taxonomic value, once it is specifi c for each viral lineage.KEY WORDS: Baculovirus, Bombyx mori, BmMNPV, polyhedra, truncated octahedron Nucleopolyhedrovirus (NPV) is an important entomopathogenic virus belonging to Baculoviridae family. It is made up of double stranded DNA molecule, associated with proteins of the capsid, forming the nucleocapsid. Two different subgroups are recognized for NPV: the occlusion derived virions and the budded virus. These virion subgroups have different functions in the infection cycle. The occluded subgroups could be divided into two subgroups: those containing one nucleocapsid per virion are referred to as single-capsid NPVs (SNPVs), whereas those containing multiple nucleocapsids per virion are known as multiple NPVs (MNPVs) (Murphy et al. 1995, Blissard 1996.Nucleocapsid and envelope constitutes the virion or infectious particle. In NPV several virions are contained in a protein structure, named occlusion body or polyhedron (Adams & McClintock 1991, Murphy et al. 1995, Blissard 1996. Polyhedra are stable structures that can persist for long time in the environment, where they are commonly found on the surface of the plants or in the soil. In the so...

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“…La dosis infectiva se expresa (cuantitativamente en términos de susceptibilidad del huésped) como porcentaje de mortalidad, concentración letal media (LC50) o dosis letal media (LD50) o tiempo letal medio (LT50) (Tañada y Kaya, 1993).…”

Section: Propiedades De Los Entomopatógenosunclassified

“…Es uno de los grupos de virus que cuentan con mayor difusión como bioinsecticidas debido a su alta virulencia y especificidad. La compatibilidad de uso de los baculovirus con otras medidas de control de insectos plaga, los hace excelentes candidatos para ser utilizados dentro de un programa de manejo integrado de plagas (Groner, 1989;Tañada y Kaya, 1993;Miller, 1996).…”

Section: Propiedades De Los Entomopatógenosunclassified

Virus de la granulosis de Epinotia aporema (barrenador de los brotes de soja): identificación y estudio biológico-molecular de un gen homólogo a la ecdisona glucosil transferasa (egt)

Manzan¹

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La capacidad de los baculovirus de producir epizootias y regular el tamaño de las poblaciones de insectos ha sido aprovechada para la sustitución de insecticidas tóxicos de amplio espectro en programas de manejo integrado de plagas. En tal sentido, numerosos baculovirus han sido desarrollados como bioinsecticidas y registrados para su comercialización. Sin embargo, salvo ciertas excepciones, el uso de baculovirus como alternativa de control de plagas se ha enfrentado con una serie de inconvenientes. En primer lugar, en la mayoría de los países, su costo de producción es elevado en comparación con el de los insecticidas químicos. En segundo lugar, la velocidad de acción de los insecticidas virales es baja (4-8 días). Por último, la producción del virus sobre larvas del hospedador requiere de un estricto control de calidad tanto de la cría de insectos como del inoculo, factor que a menudo no ha sido tenido en cuenta. Parte de estas desventajas podrían solucionarse utilizando estrategias de modificación genética del genoma viral. Es con esta premisa que en el laboratorio se abordó la caracterización bioquímica y molecular de un aislamiento viral (EpapGV) obtenido en Oliveros (Santa Fe) con alta virulencia para el insecto plaga de la soja Epinotia aporema o “barrenador de los brotes”. Se construyó una genoteca del DNA viral de EpapGV que sentó las bases para los estudios posteriores relativos al análisis del papel que juegan los diferentes factores virales en la patogenicidad en E. aporema. Específicamente se ha estudiado al gen egt y a su producto ecdisona glicosil transferasa (EGT). La elección de este gen se basó fundamentalmente en dos aspectos: la observación de un retraso en la muda de la larva de E. aporema infectada con EpapGV y la similitud de estas observaciones con otras informadas para infecciones virales producidas por NPVs, las cuales han sido asociadas a la presencia del gen egt. Los resultados obtenidos a partir de estos estudios permitieron determinar que el gen egt de EpapGV se encuentra bajo la acción de un promotor temprano y que su producto de expresión efectivamente modifica a la hormona ecdisona. Asimismo, se inició el estudio del gen de helicasa relacionado con la especificidad de rango de huéspedes. Se encontraron dos genes, helicasa I y II. Se pudo detectar que Helicasa I posee motivos asociados a su función de desenrrollamiento sobre el DNA mientras que Helicasa II posee motivos AAA-ATPasa, encontrados en la super familia 1 de las RNA helicasas virales, asociados al mantenimiento de múltiples funciones celulares. Finalmente se desarrolló un método de control de calidad de los stocks virales que formarán parte de la formulación del bioinsecticida. Se desarrolló un método de multiplex PCR que permite identificar a EpapGV en formulados bioinsectidas de manera específica y sensible. Los patrones obtenidos para este virus pueden diferenciarse de los obtenidos para un granulovirus (CpGV) y un poliedrovirus (AgMNPV). Los resultados alcanzados sobre caracterización de EpapGV contribuyeron al conocimiento de la interacción insecto-patógeno y aportaron información básica de importancia en el futuro diseño de estrategias de mejoramiento genético del virus. Además, el desarrollo de las técnicas moleculares aplicadas en el control de calidad complementa los requisitos imprescindibles para el registro del virus como insecticida biológico.

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Dna-Viral Infections: Baculoviridae

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Identificação e caracterização de isolado brasileiro do vírus de poliedrose nuclear da lagarta do cartucho-do-milho

Identificação e caracterização de isolado brasileiro do vírus de poliedrose nuclear da lagarta do cartucho-do-milho

Nucleopolyhedrovirus: scanning electron microscopy technique

Virus de la granulosis de Epinotia aporema (barrenador de los brotes de soja): identificación y estudio biológico-molecular de un gen homólogo a la ecdisona glucosil transferasa (egt)

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