Efeito da Adição de Cálcio sobre a Hiperativação Espermática: Avaliação Computadorizada

Abstract

Estudos mostram que o íon cálcio é um mensageiro intracelular que regula fenômenos celulares fisiológicos, como a motilidade e fosforilação de enzimas. O objetivo do presente trabalho foi avaliar se a adição de diferentes tipos e concentrações de íons cálcio ao diluente BTS para sêmen suíno, promove hiperativação espermática. O sêmen de 4 varrões foi coletado durante dez semanas e seus parâmetros foram analisados. O experimento contou com a utilização de diferentes tipos de cálcio: carbonato de cálcio (CaCO3), hidróxido de cálcio (Ca(OH)2), fostato dibásico anidro de cálcio (CaHPO4), sulfato hidratado de cálcio (CaSO4.2H2O) e sulfato anidro de cálcio (CaSO4), distribuídos em diferentes concentrações: 0mM = controle; 0,4mM e 4mM. As amostras foram armazenadas a 17 oC e posteriormente incubadas a 37 oC para a avaliação computadorizada, realizada do D0 (dia da coleta) até D2 (último dia de incubação). Os testes de viabilidade e morfologia espermática foram realizados no D0 e D2. Os resultados para a concentração de 4 mM (CaHPO4, CaSO4.2H2O e CaSO4) indicaram um aumento da velocidade média da trajetória (≥40μm/s) e da freqüência de batimento cruzado (≥8,0Hz), além da redução da linearidade (≤35%). Concluiu-se que a adição de 4 mM de CaHPO4, CaSO4.2H2O e CaSO4 gerou a hiperativação das células espermáticas e não exerceu efeito negativo sobre a membrana espermática, ressaltando-se que a hiperativação das células espermáticas poderia aumentar a capacidade fertilizante dos espermatozoides em fertilização in vitro ou em processos de transferência de gametas intrafalopianos. Dessa forma, estudos adicionais são necessários para verificar a sua eficiência. Palavras chave: Espermatozoide. Motilidade. Suíno. Linearidade. Abstract Studies show that the calcium ion is intracellular messenger that regulates physiological cellular phenomena, such as motility and enzyme phosphorylation. The aim of the present study was to evaluate whether the addition of different types and concentrations of calcium ions to the BTS diluent for swine semen can promote sperm hyperactivation. The semen from 4 boars was collected during ten weeks and its parameters were analyzed. The experiment used different types of calcium: calcium carbonate (CaCO3), calcium hydroxide (Ca(OH)2), anhydrous calcium dibasic phosphate (CaHPO4), hydrated calcium sulfate (CaSO4.2H2O) and anhydrous calcium sulfate (CaSO4), distributed in different concentrations: 0mM = control; 0.4mM and 4mM. The samples were stored at 17 oC and then incubated at 37 oC for computerized evaluation, performed from D0 (collection day) to D2 (last day of incubation). The viability and sperm morphology tests were performed on D0 and D2. The results for the concentration of 4mM (CaHPO4, CaSO4.2H2O and CaSO4) indicated an increase in the average path velocity (≥40μm/s) and in the cross-beat frequency (≥8.0Hz), in addition to a reduction in linearity (≤35%). It was concluded that the addition of 4mM of CaHPO4, CaSO4.2H2O and CaSO4 generated the sperm cells hyperactivation and had no negative effect on the sperm membrane, emphasizing that the sperm cells hyperactivation could increase the sperm fertilizing capacity in in vitro fertilization or in intrafalopian gamete transfer processes. Thus, additional studies are necessary to verify its efficiency Keywords: Sperm. Motility. Swine. Linearity.