Efeito da irrigação ultrassônica e da medicação intracanal com hidróxido de cálcio na quantidade e no metabolismo de bactérias que persistiram após o preparo dos canais radiculares de dentes com periodontite apical

Abstract

Nogales CG. Effect of ultrasonic irrigation and calcium hydroxide intracanal medication on the levels and metabolism of bacteria that persisted after root canal preparation of teeth with apical periodontitis [thesis]. São Paulo: Universidade de São Paulo, Faculdade de Odontologia; 2019. Versão Original. Molecular studies highlight the limitations of the traditional endodontic protocol in eliminating bacteria from the root canal. Although chemo-mechanical procedures (CMP) provide a drastic bacterial reduction, many canals remain infected after this treatment step. Thus, studies point out to the need for technical complementation to enhance root canal disinfection after CMP. Thus, the aim of this clinical study was to evaluate, by molecular methods based on DNA and RNA, the effect of supplementary preparation methods on root canal disinfection. Microbiological samples from the root canals of 20 single rooted teeth with apical periodontitis were performed at different steps of endodontic treatment: prior to preparation (S1); after chemo-mechanical procedures with Reciproc system associated with 2.5% NaOCl (S2) irrigation; after passive ultrasonic irrigation, or PUI (S3); and after calcium hydroxide intracanal medication (S4). The samples were submitted to DNA and RNA extraction. The RNA was submitted to reverse transcription reaction (RT-PCR) to make the complementary DNA double strand (cDNA). DNA and cDNA were submitted to qPCR reactions with universal primers for the 16S rRNA region of the Bacteria domain. The metabolic activity of bacteria was verified by the relation of rRNA and rDNA levels as determined by qPCR assays. Data were analyzed by Wilcoxon test for paired samples (p <0.05). S1 samples from the 20 cases had high levels of bacterial rDNA (median

Efeito do preparo químico-cirúrgico na atividade bacteriana em canais radiculares associados a periodontite apical assintomática: estudo molecular baseado em RNA e DNA

“…Por isso, a associação de métodos moleculares baseados em rRNA e rDNA permitiu a análise simultânea do metabolismo e quantidade de bactérias após o preparo químico-cirúrgico dos canais radiculares. Essa estratégia foi inicialmente empregada na área de microbiologia ambiental e médica (Matsuda et al, 2007;Campbell et al, 2011;Pitkänen et al, 2013) e foi recentemente utilizada para avaliar a atividade de bactérias em amostras endodônticas após diferentes protocolos de tratamento (Romero Cazares, 2018;Nogales, 2019: Carvalho et al, 2020.…”

“…As estratégias moleculares para detecção da viabilidade foram diferentes nos estudos prévios. Rôças e Siqueira (2010) utilizaram rRNA (cDNA) como molde para a reação de hibridização de DNA-DNA, enquanto outros estudos utilizaram o uso combinado de qPCR baseada em rDNA e rRNA para detecção de bactérias totais nos canais radiculares(Romero Cazares, 2018;Nogales, 2019;Carvalho et al, 2020). A simples detecção do rRNA bacteriano não determina se a bactéria está ativa.…”

“…Nesse estudo, não houve diferença significativa entre os níveis de rRNA e rDNA de bactérias totais nas amostras após o PQC de dentes com infecções primárias, sugerindo que o preparo foi suficiente para refrear o metabolismo bacteriano. Porém, uma limitação do estudode Carvalho et al (2020) e de outros trabalhos semelhantes(Romero Cazares, 2018;Nogales, 2019) foi o…”