La producción de plántulas de fresa con cepellón es una tecnología de propagación poco difundida con la que se pueden obtener plantas vigorosas, sanas y productivas. La presente investigación tuvo como objetivo evaluar el efecto de cuatro sustratos y la aplicación de auxinas en la propagación de plántulas de fresa. El experimento se realizó en condiciones de malla sombra, estableciendo estolones primarios de fresa cultivar Chandler en recipientes de poliestireno con alveolos de 118 ml, y se colocó estolón por recipiente. Los tratamientos consistieron en la evaluación de cuatro tipos de sustratos: perlita, pumita, turba y agua) con aplicación de AIB y sin aplicación de AIB. Se realizaron tres muestreos destructivos a los 42, 58 y 72 días después del establecimiento. Se utilizó un diseño completamente al azar con tres repeticiones en arreglo factorial. Se evaluó el porcentaje de mortandad, altura de planta, diámetro de corona, número de hojas, área foliar, peso fresco y seco del vástago y raíz, calidad del cepellón. Se determinó que el tipo de sustrato influye en el crecimiento de raíz y dosel vegetal, siendo en el sustrato pumita en el que se obtuvieron plántulas de mayor calidad. En general, la aplicación exógena de la auxina no favoreció el desarrollo de las plántulas durante el periodo evaluado.