Effect of Tobacco Mosaic Virus Protein on Tobacco Mosaic Virus Infectivity

Abstract

The timing of the bidirectional growth in the assembly reaction of tobacco mosaic virus has been the subject of controversy: Does elongation actually occur simultaneously to 5' and 3' ends or sequentially, first to the 5' end and then to the 3' end? To determine the timing of elongation toward the 3' end directly, using the S1 nuclease mapping method on a cloned cDNA with micrococcal nuclease-digested tobacco mosaic virus RNA, we analyzed encapsidation of the RNA region that was located downstream from the assembly origin. The results clearly showed that elongation toward the 3' end did not occur for at least the first 4 min. Actually it was first observed at 8 min. It is concluded that, in the first 5-7 min, a rapid elongation of the nucleation complex occurs only toward the 5' end of the RNA and that this gives rise to an intermediate particle 260 nm long. Furthermore, the lengths of the RNA that were protected against S1 nuclease digestion showed a clear banding pattern that had a spacing of 100 nucleotides. This supports the hypothesis that the 20S aggregate is kinetically favored as the protein source for elongation to the 3' end.

Untersuchungen über Hemmechanismen in virusinfizierten Pflanzen..

“…Der Zerfall von Virusaggregationen bei Verdunnung des Inokulums soil dann zunadist zu einem ansteigenden Infektionserfolg fiihren (FRANCKI 1964 (HOFFEREK und PROLL 1967). Ahnliche Effekte sind bereits friiher von anderen Autoren bei Versuchen mit Tabakmosaikvirus beobachtet worden (SANTILLI, PIACITELLI und Wu 1961, HOLOUBEK 1964, YosHiZAKi und MuRAYAMA 1966. Eigene Versuche mit gereinigtem TrMV ergaben bisher nur dann annahernd den zu erwartenden (theoretisdien) Verlauf der Infektiositatsverdiinnungskurve, wenn das nadi der Methode von F*ROLL und SCHMIDT (1964) hergestellte Praparat einer Zentrifugation im Rohrzuckerdiditegradienten unterw^rfen worden war, Diese Ergebnisse berechtigen zu der An-nahme, dafi in einem virushaltigen Inokulum und an den Infektionsorten der Wirtspflanze, mogHdherweise auch innerhalb der infizierten Zellen, zwischen infektiosen und nichtinfektiosen Viruskomponenten Wechselwirkungen oder Konkurrenzersdieinungen auftreten, die bei besonders gunstigen Konzentrationsverhaltnissen den Infektionstrfolg und damit die Vermehrungsgeschwindigkeit des Virusnukleoproteides stark beeintrachtigen.…”