Effects of platelet glycoprotein IIb-IIIa number and glycoprotein IIIa Leu33Pro polymorphism on platelet aggregation and sensitivity to glycoprotein IIb-IIIa antagonists

Abstract

We investigated the influence of glycoprotein (GP) IIIa Leu33Pro polymorphism, platelet GP IIb-IIIa number, and plasma fibrinogen concentration on platelet aggregation and antiaggregatory action of GP IIb-IIIa antagonists. Healthy volunteers with GP IIIa Pro33(-) (Leu33Leu33, n = 20) and Pro33(+) (Leu33Pro33, n = 13, and Pro33Pro33, n = 2) genotypes were included into the study. GP IIIa Leu33Pro substitution was associated with the increase of the level and rate of platelet microaggregate formation induced by GP IIb-IIIa activating antibody CRC54 (100, 200, 400 microg/ml) against the epitope within 1-100 residues of GP IIIa N-terminal part (p from 0.001 to 0.047). No significant differences were detected between parameters of platelet aggregation induced by ADP (1.25, 2.5, 5.0, 20 microM) in GP IIIa Pro33(+) and Pro33(-) donors. GP IIb-IIIa antagonist Monafram (F(ab')(2) fragment of GP-IIb-IIIa blocking antibody CRC64) (1, 2, 3 microg/ml), but not eptifibatide (50, 100, 150 ng/ml) inhibited ADP-induced aggregation slightly less efficiently in GP IIIa Pro33(+) group (p < 0.05 at 1 and 2 microg/ml Monafram). GP IIb-IIIa number (evaluated as maximal binding of (125)I-labelled antibody CRC64) varied from 40.5 to 80.8 x 10(3) per platelet with no significant influence of GP IIIa genotype. Consistent correlations were revealed between GP IIb-IIIa quantity and the level and rate of ADP-induced aggregation (r from 0.353 to 0.583, p from <0.001 to 0.037) as well as resistance (level of residual aggregation) to both GP IIb-IIIa antagonists (r from 0.345 to 0.602, p from <0.001 to 0.042). ADP-induced aggregation was considerably increased and efficiency of GP IIb-IIIa antagonists decreased in donors with high in comparison with low GP IIb-IIIa quantity (>60 and 40-50 x 10(3) per platelet respectively, p < 0.01 for most tests). No correlations were observed between all tested parameters and plasma fibrinogen concentration. Our results indicate that inter-individual variability of platelet GP IIb-IIIa number significantly affects platelet aggregation and antiaggregatory effects of GP IIb-IIIa antagonists. Contribution of this factor is higher than that of GP IIIa Leu33Pro polymorphism and variations of fibrinogen concentration.

Mean platelet volume: interactions with platelet aggregation activity and glycoprotein IIb-IIIa and Ib expression levels

“…Содержание ГП IIb-IIIa и ГП Ib на поверхности тромбоцитов определяли, как описано ранее [14,15], используя 125 I-меченые моноклональные антитела против этих белков. Содержание тромбоцитов в ОТП доводили аутологичной плазмой до 2,5´10 8 на 1 мл, а при более низкой концентрации тромбоцитов использовали неразведенную ОТП.…”

“…Содержание тромбоцитов в ОТП доводили аутологичной плазмой до 2,5´10 8 на 1 мл, а при более низкой концентрации тромбоцитов использовали неразведенную ОТП. Для определения ГП IIb-IIIa применяли комплекс-специфическое антитело CRC64 [14], а для определения ГП Ib -антитело VM16d [33]. 125 I-меченые антитела добавляли к ОТП в конечной концентрации 10 мкг/мл в отсутствие или в присутствии 20-кратного избытка немеченых антител (для измерения общего и неспецифического связывания соответственно).…”

“…Данные о влиянии СОТ на содержание ГП IIb-IIIa соответствуют результатам, недавно опубликованной работы [16], выполненной в сходных группах доноров и пациентов. Отсутствие каких-либо эффектов ГП IIIa Leu33Pro полиморфизма на уровень экспрессии ГП IIb-IIIa подтверждают как наши собственные данные, полученные ранее при исследовании здоровых добровольцев [14], так и данные других авторов [12,13,29,30]. В обеих исследованных нами группах -здоровых добровольцев и больных с ОКС была впервые обнаружена сильная взаимосвязь между СОТ и содержанием еще одного адгезивного рецептора тромбоцитов -ГП Ib.…”

“…Количество молекул клеточной адгезии на поверхности тромбоцитов может значительно варьировать как у здоровых лиц, так и у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями -от двукратных вариаций для ГП IIb-IIIa [10][11][12][13][14][15][16] и ГП Ib [12,13,15,[17][18][19], до 5-кратных -для ГП VI [20,21] и 10-кратных -для a2/b1 интегрина [16,22,23]. Взаимосвязи между содержанием этих молекул и интенсивностью опосредуемых ими тромбоцитарных реакций были продемонстрированы для ГП IIb-IIIa [14,15], ГП VI [20,21] и a2/b1 интегрина [22,24].…”

“…Взаимосвязи между содержанием этих молекул и интенсивностью опосредуемых ими тромбоцитарных реакций были продемонстрированы для ГП IIb-IIIa [14,15], ГП VI [20,21] и a2/b1 интегрина [22,24]. Эти данные указывают на то, что уровень этих белков может быть важным индикатором активности тромбоцитов.…”