Eficacia experimental de anticuerpos IgY producidos en huevos, contra el veneno de la serpiente peruana Bothrops atrox

Abstract

Objetivos. Desarrollar un protocolo de inmunización para producir inmunoglobulinas Igy de origen aviar contra el veneno de la serpiente peruana Bothrops atrox y evaluar la capacidad neutralizante. Materiales y métodos. Se inmunizaron seis gallinas de postura de la raza hy line brown con 500 µg/dosis de veneno de B. atrox en un periodo de dos meses. Cada semana, los huevos fueron colectados para el aislamiento de inmunoglobulinas Igy a partir de la yema, usando dos pasos consecutivos con ácido caprílico y sulfato de amonio. La detección de anticuerpos se realizó por inmunodifusión doble mientras que el título y reactividad cruzada se determinaron por las técnicas de ELISA y Western blot. El cálculo de DL 50 y de la DE 50 del antiveneno Igy producido se realizó utilizando el método de Probits. Resultados. La masa de anticuerpos aislados fue de 8,5 ± 1,35 mg de Igy/mL de yema. Asimismo, la DE 50 del antiveneno aviar fue calculada en 575 µL de antiveneno/mg de veneno. Adicionalmente, los ensayos de reactividad cruzada mostraron que el veneno de B. atrox comparte mas epítopes comunes con el veneno de B. brazili (47%) que con otros veneno del mismo género, en tanto que los venenos de Lachesis muta (19%) y Crotalus durissus (12%) mostraron una baja reactividad cruzada. Conclusiones. Se ha obtenido Igy purificada contra el veneno de B. atrox con capacidad neutralizante y se ha demostrado su utilidad como herramienta inmunoanalítica para evaluar la reactividad cruzada con venenos de otras especies.

Egg yolk antibodies (IgY) and their applications in human and veterinary health: A review

“…Mendonza et al also produced IgY capable of neutralizing the venom of the peruvian snake Bothrops atox. The anti-venom IgY showed considerable cross reaction with the venom of Bothrops brazili and could be used not only as B. atox anti-venom, but also as a tool for the research of cross reaction with venoms from different species [9].…”

“…Nonetheless, the amount of antibodies produced is correlated to the quantity of antigen applied to the hen, its immunogenicity and molecular weight [5,6]. Being a productive technique, as well as more refined from the point of view of animal welfare, IgY technology has been used for several purposes in human and veterinary health, such as in immunodiagnostics [7], immunotherapy [8], neutralization of toxins from venomous animals [9] and bacteria [10], and as functional food [11].…”

IgY-based antivenom against Bothrops alternatus: Production and neutralization efficacy

“…Contamination of undesired proteins in the IgY antivenoms can be reduced during the scaling up of the purification steps. For example, use of caprylic acid combined with ammonium sulphate is able to eliminate several contaminant proteins (Araújo et al, 2010;Mendoza et al, 2012).…”