Eine chemo‐enzymatische Modifizierung der 5′‐Kappe erhält die Translation und erhöht die Immunogenität der mRNA

Abstract

Eukaryotischem RNAs zählen zu den neuartigen Modalitäten fürProteinersatztherapien und Schutzimpfungen. Die 5'-Kappe ist fürd ie mRNA-Translation und die Immunantwort von Bedeutung und kann naturgemäßd urch S-Adenosyl-l-Methionin (AdoMet)-abhängige Methyltransferasen (MTasen) an verschiedenen Positionen methyliert werden. Wirberichtenvom Cosubstrat-Spektrum der MTase CAPAM, die fürd ie Methylierung der N 6 -Position von Adenosin-Start-Nukleotiden verantwortlichi st und verwenden dazu synthetische AdoMet-Analoga. Die chemo-enzymatische Propargylierung ermçglicht die Herstellung von ortsspezifischmodifizierten Reporter-mRNAs.D iese Kappen-propargylierten mRNAs wurden effizient translatiert und zeigten eine % 3-fach erhçhte Immunantwort in menschlichen Zellen. Derselbe Effekt wurde beobachtet, wenn die Rezeptorbindedomäne (RBD) von SARS-CoV2 -e in aktuell getestetes Epitop fürm RNA-Impfungen -v erwendet wurde. Die ortsspezifische chemo-enzymatische Modifizierung von eukaryotischer mRNAk çnnte somit eine geeignete Strategie zur Modulierung der Translation und Immunantwort eukaryotischer mRNAs fürz ukünftige therapeutischeA pplikationen darstellen.