Elimination of Citrus Tristeza Virus from Triploid Pummelo Cultivar [Citrus maxima (Burm.) Merr.] by In Vivo Micrografting on Seedlings of Three Citrus Cultivars

Abstract

Seedlessness in Citrus cultivars is one of the important characters accepted by consumers. Triploid pummelo contains no or a few seeds even though they are planted in a mixed block. Four triploid pummelo hybrids bred in Kyushu University are in the course of registration for new seedless cultivars release. Citrus tristeza virus (CTV) may be the catastrophic cause of decline of the production when the new pummelo cultivars release and expand. Therefore, virus test for the original trees and production of virus-free clones before the release are necessary. Micrografting with shoot apices of scions on the epicotyls of decapitated seedlings is the best ways to remove viruses in Citrus. In this study, shoot tips with 2, 4 or 6 leaf primordia of CTV-infected triploid pummelo 112A were grafted in vivo on 2-week-old seedlings of 'Hiradobuntan' pummelo, 'Natsudaidai' tangelo and 'Variegated Daidai' sour orange rootstocks to seek suitable rootstock seedlings and produce CTV-free clones. It was verified from this study that the larger the shoot tip size, the higher the rate for success in in vivo micrografting. All of the shoots derived through in vivo micrografting of shoot tips with 2, 4 or 6 leaf primordia were determined to be CTV-negative through immunochromographic assay 9-12 months after micrografting; however, 26.3 % of the shoots showed positive for CTV through RT-PCR test. The resulting virus free shoots (73.7 %) will be vegetatively propagated and proliferated for cultivar release.

Vi ghép bưởi năm roi (Citrus grandis cv. ‘nam roi’) trong điều kiện in vivo

“…Ngoài ra, kết quả nghiên cứu của Balliu and Sallaku (2017) cho thấy mặt cắt của gốc ghép được ngâm Indole acetic acid (IAA) hoặc Indole butyric acid (IBA) ở nồng độ 10-20 mg/L trong vài giây trước khi ghép có thể làm tăng tỷ lệ sống và sinh trưởng của cây dưa sau khi ghép. Le (2019) đã ghi nhận được tiền xử lý α-Naphthalene acetic acid (NAA) 0,2 mg/L và 0,4 mg/L vào vết cắt gốc ghép cho tỷ lệ thành công khi ghép từ 8% và 13% khi vi ghép chồi quýt (C. unshiu Marc.) có 2 lá sơ khởi trong khi tất cả các chồi ghép đều chết khi không bổ sung NAA.…”

“…Theo Nhựt (2007), đối với một số cây khó ghép như cây hồ đào, quá trình tạo thành keo vết thương diễn ra rất chậm và sẽ làm các mô ở vùng ghép bị mất nước và chết. Theo Le (2019), việc thêm NAA vào vết cắt trước khi đặt chồi ghép cho TLS khi ghép chồi quýt khá cao từ 8%-36% chồi ghép sống (nồng độ 0,2 mg/L, chồi với 2-6 lá sơ khởi) và 14%-43% chồi sống (nồng độ 0,4 mg/L, chồi với 2-6 lá sơ khởi). Điều này có thể do NAA đã kích thích sự hình thành mô sẹo ở vị trí ghép từ đó làm tăng khả năng kết hợp giữa chồi ghép và gốc ghép.…”

“…Trên cây quýt, những chồi ghép từ 0,2 -0,3 mm (2 lá sơ khởi) là tối ưu trong vi ghép để loại bỏ virus tristeza tạo ra cây sạch bệnh mà không cần kết hợp xử lý nhiệt (Abbas et al, 2008), tương tự với kết quả của Navarro et al (1976). Kết quả tương tự được ghi nhận bởi Le et al (2021), TLS của chồi bưởi tam bội với 2 lá sơ khởi khi ghép trên gốc Hirado-buntan (9,1%) cao hơn chồi 4 và 6 lá sơ khởi (5%), tất cả các mẫu ghép sống đều không nhiễm Citrus tristeza virus.…”