N. caninum es un parásito protozoario del filo Apicomplexa , y ha sido reconocido como una causa importante de aborto y falla reproductiva en el ganado de todo el mundo. Aunque en Colombia existen algunos estudios sobre la seroprevalencia de esta enfermedad, la información sigue siendo limitada. Objetivo. Establecer la seroprevalencia de N. caninum en vacas lecheras del municipio de Tuta (Boyacá, Colombia). Materiales y Métodos. Se muestrearon 375 animales. Las muestras se procesaron bajo la técnica de ELISA indirecta, se realizó un análisis estadístico con la prueba de Chi-cuadrada de asociación-independencia para determinar si existía relación entre la presencia de anticuerpos contra N. caninum y las diferentes variables reproductivas. Resultados. Se observó que el 52% de los individuos fueron positivos a anticuerpos contra N. caninum, la única variable reproductiva que presentó relación estadística con la presencia del protozoo fue repetición de celo, no existió relación entre edad y raza de los bovinos y la presentación de N. caninum. Conclusión. La seroprevalencia es elevada si se tienen en cuenta los datos de seroprevalencia reportados con anterioridad en otras regiones del país, no obstante, estos resultados no demostraron la presencia de enfermedad en los animales analizados, pero si la evidencia antigénica, lo que sugiere que en algún momento de la vida se infectaron con el agente y promovieron la formación de anticuerpos específicos.