Estudo comparativo entre as técnicas de coloração de Sellers, imunofluorescência direta e inoculação em camundongos aplicadas ao diagnóstico laboratorial da raiva canina

Germano, Pedro Manoel Leal; Miguel, Omar; Chamelet, Esther Luiza Bocatto; Morita, L.

doi:10.11606/issn.2318-3659.v14i1p133-141

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“…Isso torna evidente que uma concordância completa entre os testes pode não ocorrer em todos os casos (ZIMMER et al, 1990). Essa discordância de resultados pode ser atribuída ao estado de conservação da amostra, às reações individuais à doença, ao perío-do de incubação e à evolução do quadro clínico, seja para morte espontânea ou sacrifício precoce (GERMANO et al, 1977).…”

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“…Atualmente, a imunofluorescência direta (IFD) em tecidos refrigerados ou congelados é considerada a técnica de escolha para o diagnóstico da raiva pela sua rapidez e acurácia (ZIMMER et al, 1990). A inoculação intracerebral em camundongos é mais segura de todas as provas diagnósticas para raiva, porém tem a desvantagem de ser demorada (GERMANO et al, 1977). Em muitas ocasiões, o material é enviado fixado ao laboratório, impossibilitando a realização de IFD.…”

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Aspectos epidemiológicos, clínicos e distribuição das lesões histológicas no encéfalo de bovinos com raiva

et al. 2003

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Aspectos epidemiológicos, clínicos e distribuição das lesões histológicas no encéfalo de bovinos com raiva

et al. 2003

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“…Devido sua rapidez (horas) e acurácia (sensibilidade e especificidade próximas a 100%), a IFD é o teste padrão utilizado para o diagnóstico da raiva (Zimmer et al 1990, Rodriguez et al 2007, Teixeira et al 2008. A inoculação intracerebral em camundongos é prova diagnóstica complementar com alta sensibilidade, mas demorada, se comparada à IFD (Germano et al 1977). A imuno-histoquímica (IHQ) é de fácil utilização em amostras fixadas em formol, diminuindo o risco de alterações autolíticas comprometerem o diagnóstico (Radostits et al 2002, Arslan et al 2004, Pedroso et al 2008.…”

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Aspectos clínicos e patológicos em bovinos afetados por raiva com especial referência ao mapeamento do antígeno rábico por imuno-histoquímica

et al. 2009

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ABSTRACT. - This retrospective study included clinical and pathological findings from 15 cattle affected by rabies. Thirteen of the 15 cases were confirmed by direct immunofluorescence. Cattle between 4 months and 8 years of age were affected. Clinical course ranged from 3 to 7 days. Paralytical form was the most common clinical picture and included incoordination, paresis, and paralysis of the pelvic members, besides recumbence, paddling, and death. The main histopathological findings were lymphoplasmacytic meningoencephalitis associated with characteristic Negri bodies in 86.6% of the cases. All cases showed antirabies immunostaining, which were most prominent in the brainstem including medulla oblongata, pons, and midbrain, besides trigeminal ganglion. Positive labeling was present within axons, dendrites, and perikarya of neurons as aggregates of granules or round formations associated with varying numbers of inclusion bodies. Immunostaining was also observed in the Purkinje neurons and their processes in the molecular layer, in the neurons of of the brainstem, and deep layer of the telencephalic cortex. Immunohistochemistry may be an important auxiliary tool for the diagnosis of rabies, especially in circumstances in which refrigeration cannot be adequately maintained, and in cases characterized by nonsuppurative meningoencephalitis with absence of inclusion bodies.

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“…Outro teste utilizado é a inoculação intracerebral em camundongos que apesar de ser mais específi-ca, tem a desvantagem de ser demorada quando comparada a IFD (Germano et al 1977).…”

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Padronização da técnica de imuno-histoquímica para raiva em amostras de tecido do sistema nervoso central de bovinos fixadas em formol e emblocadas em parafina

et al. 2008

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Pesq. Vet. Bras. 28(12):627-632, dezembro 2008 RESUMO.-Para a padronização da técnica de imunohistoquímica para raiva foram utilizadas cinco amostras de SNC de bovinos infectados naturalmente com o vírus da raiva usando-se um anticorpo policlonal e dois monoclonais. Para a recuperação antigênica foram avaliados os seguintes reagentes: protease XIV, proteinase K e tampão citrato pH 6,0 mantido a 100°C por 15 minutos. A detecção de antígeno rábico nas amostras foi possível com os três anticorpos utilizados. O anticorpo policlonal foi superior aos anticorpos monoclonais, demonstrando bons resultados com os três protocolos de recuperação antigênica, obtendo uma maior intensidade de marcação quando utilizado o tampão citrato e calor. A técnica de imuno-histoquímica demonstrou a presença do antígeno viral no citoplasma de neurônios na forma de agregados de grânulos ou de forma redonda ou oval, mostrando cor- One polyclonal antibody and two monoclonal antibodies were used. The following reagents were evaluated for antigen retrieval: XIV protease, proteinase K and citrate buffer (pH 6.0) boiling at 100°C during 15 minutes in bain-marie. Detection of rabic antigen was possible with the three antibodies tested. The polyclonal antibody was superior to the monoclonal antibodies, demonstrating good results with the three antigen retrieval protocols. The highest intensity staining was obtained with the citrate buffer and heat. The immunohistochemistry technique demonstrated the presence of viral antigens in the cytoplasm of neurons, in form of aggregates or with round or oval shape. The antigens were found as single or multiples inclusion bodies in the neurons. Immunohistochemistry is a fast method that can be used in routine procedures in cases where rabies is suspected, especially when the brain is submitted to the laboratory as formalin-fixed fragments or when samples could not be immediately shipped. The technique is also useful for retrospective studies.INDEX TERMS: Diseases of cattle, infectious diseases, diseases of the central nervous system, rabies, immunohistochemistry standardization.

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Estudo comparativo entre as técnicas de coloração de Sellers, imunofluorescência direta e inoculação em camundongos aplicadas ao diagnóstico laboratorial da raiva canina

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Aspectos epidemiológicos, clínicos e distribuição das lesões histológicas no encéfalo de bovinos com raiva

Aspectos epidemiológicos, clínicos e distribuição das lesões histológicas no encéfalo de bovinos com raiva

Aspectos clínicos e patológicos em bovinos afetados por raiva com especial referência ao mapeamento do antígeno rábico por imuno-histoquímica

Padronização da técnica de imuno-histoquímica para raiva em amostras de tecido do sistema nervoso central de bovinos fixadas em formol e emblocadas em parafina

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