Evaluación de la prueba ELISA usando una cepa de campo como antígeno, para detectar anticuerpos contra el virus de la Rinotraqueitis Bovina Infecciosa

Abstract

ResumenEl siguiente estudio estableció un inmunoensayo enzimático ELISA, usando partículas virales fraccionadas de una cepa de campo del virus IBR, este mostró una alta sensibilidad y especificidad y una baja tasa de falsos negativos y positivos. Los sueros bovinos positivos y negativos, con los cuales se normalizó la técnica de ELISA, fueron analizados por seroneutralización para determinar anticuerpos anti IBR; se recolectaron sueros negativos y positivos con títulos 1:4 a 1:128 y se consideró la dilución del suero bovino 1:50, como la dilución óptima para la técnica de ELISA. Por otra parte, se utilizó el coeficiente de variación BR, para analizar el grado de repetitibilidad de las absorbancias obtenidas de los sueros positivos y negativos, se obtuvo resultados menores del 20%, lo que indico una adecuada repetitibilidad y un bajo coeficiente de variación. La sensibilidad y especificidad encontrada fue de 96 y 98% respectivamente, teniendo como prueba de referencia la seroneutralización. Los resultados obtenidos, determinan que la prueba de ELISA con partículas virales fraccionadas de una cepa de campo, detecta anticuerpos anti IBR con alta sensibilidad y especificidad, siendo una herramienta para el mejoramiento diagnóstico de la enfermedad.Palabras Claves: ELISA, seroneutralización, rinotraqueitis bovina infecciosa, anticuerpos, mejoramiento diagnóstico. Abstract Evaluation of ELISA test use of field strain (antigen) to detect antibodies against InfectiousBovine Rhinotracheitis virus.The following study set up an enzymatic immune test (ELISA) using viral particles broke up of field strain of IBR virus; it showed a high sensibility and specificity and low rate of false negatives and positives. Positive and negative bovine serum which ELISA technique was normalized, were analyzed by seroneutralization to determine anti IBR antibodies; It was collected positive and negative serum with titles 1:4 to 1:128 and was considered dilution of bovine serum 1:50 as optimal dilution to ELISA technique.On the other hand, coefficient of variation BR was used to analyze the rehearsing of absorbance obtained by positive and negative serum. The results obtained were less than 20%, which indicated an appropriate

Seroprevalencia de rinotraqueitis infecciosa bovina en hatos lecheros de Toca – Boyacá

“…La seroprevalencia hallada para IBR en el municipio de Toca -Boyacá, fue, con la respectiva corrección para una sensibilidad del 96% y especificidad del 97%, de 35.65% (Tabla 1) con un intervalo de confianza (95%) de 24.7 a 46.5%, lo que significa que de los 80 bovinos muestreados 28 vacas presentaron la enfermedad, con valores S/P que estuvieron entre 0.93 y 4.07, dejando 52 hembras como negativas, con S/P entre 0 y 0.34, y ningún animal sospechoso. De acuedo con los resulltados obtenidos, se presume que la seropositividad expresada en los animales en estudio y la ausencia de manifestaciones clínicas evidentes, se pueden explicar por el hecho de que la IBR es una enfermedad primaria de fácil contagio y manifestaciones variadas (15), que tiene la facultad de establecer un estado de latencia, lo que permite al virus eludir el sistema inmunológico del organismo y mantenerse en el tiempo ( 16), provocando altas tasas de morbilidad, que en Colombia oscilan entre el 20-30% (13). Las diferentes formas de la enfermedad podrían expresarse en la circunstancia de que haya reactivación viral, favorecida por factores estresantes que determinan un grado de inmunosupresión o inmuno-inhibición en los animales, con lo cual se interrumpiría el estado de latencia, dando lugar a la propagación del virus infeccioso y transmisión a los animales susceptibles (17).…”

“…Con base en lo anterior, y de acuerdo con los registros del laboratorio, se consideró que los animales positivos a IBR tendrían S/P≥55%; animales sospechosos presentarían S/P=45%-55% y animales negativos mostrarían S/P≤45% (1,(12)(13)(14).…”