Evaluation of an improved coomassie dye binding method for urinary protein assay

Macart, M; Gerbaut, L

doi:10.1016/0009-8981(84)90169-4

Cited by 21 publications

(12 citation statements)

References 13 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…O método de biureto tem sido aplicado para determinar a concentração de proteínas totais em diversos meios, sendo eles: soro ou plasma sangüíneo 15,16,18,19 , líquido cérebro espinhal (líqüor) 20,21 , urina [22][23][24] , alimentos [25][26][27][28][29] , saliva 30 , fibrinogênio 31 e tecido animal 32 . O método de biureto tem sido, também, utilizado em análise por injeção em fluxo 19 , assim como em alguns métodos cinéticos 21,33 .…”

Section: Aplicaçõesunclassified

“…O método de biureto tem sido, também, utilizado em análise por injeção em fluxo 19 , assim como em alguns métodos cinéticos 21,33 . Apesar de ser rápido, utilizar reagentes de baixo custo e não apresentar grande variação da absortividade específica para diferentes proteínas 9,20,21,30 , este método não é muito sensível, como foi destacado por diversos autores 20,24,30 , colocando-o em grande desvantagem, em relação a outras metodologias, e por isto tem sido, ao longo dos anos, substituído por métodos mais sensíveis. Mesmo assim, o método de biureto continua sendo recomendado para a determinação da concentração de proteínas totais em plasma sangüíneo pela Associação Americana de Análises Clínicas e por diversos autores 15,16,34 , bem como para a determinação de proteínas totais em saliva 30 e leite 29 , quando comparado com outros métodos.…”

Section: Aplicaçõesunclassified

“…Algumas substâncias que interferem na determinação de proteínas totais pelo método de biureto 9 . 24 . No entanto, com relação à urina, diversos autores destacam dois fatores contra a utilização desta metodologia, sendo um deles a dependência entre o número de diluições da amostra e o resultado da concentração de proteína obtido e, o outro, a presença de proteínas de baixo peso molecular, subestimando a concentração de proteínas totais na urina, principalmente, de pacientes com proteinúria 22 Algumas metodologias utilizando equipamentos automatizados 80,97-101 estão tornando este método mais rápido.…”

Section: Interferentesunclassified

“…Para tentar tornar mais uniforme a absortividade específica de diferentes proteínas, algumas alternativas foram sugeridas: aumentar a concentração do corante 103 ; aumentar a solubilização das proteínas que vão reagir com o corante, usando detergentes 24,79,84,86,[104][105][106] , hidróxido de sódio 84,107 ou fenol 108 ; ou aquecer com uréia e 2-mercaptoetanol 109 . Entretanto, no caso de amostras com proteínas de baixo peso molecular, não recomendamos a utilização deste método.…”

Section: Interferentesunclassified

See 3 more Smart Citations

Determinação de proteínas totais via espectrofometria: vantagens e desvantagens dos métodos existentes

Zaia

Lichtig

1998

Quím. Nova

View full text Add to dashboard Cite

tein is used in several areas such as clinical analysis, food science and technology, biochemistry, protein chemistry, physiology. Five spectrophotometric methods are mostly used: biuret, Lowry, Bradford, Smith and UV absorption. In this review a general overview of these methods is presented (interferences, applications); other methodologies are also discussed.Keywords: protein; spectrophotometry; protein analysis. DIVULGAÇÃO INTRODUÇÃOO desenvolvimento de metodologias e estudos comparativos de metodologias espectrofotométricas para a determinação de proteínas totais sempre foram de grande interesse para profissionais, tanto ligados à indústria de alimentos, laboratórios de análises clínicas, como para pesquisadores de diversas áreas. Apesar de os profissionais serem de diferentes áreas e, portanto, com objetivos diferentes, observamos que os questionamentos são sempre os mesmos: Quais são os principais interferentes no método que estou usando? Qual é o método mais adequado para meu caso? Qual é o princípio envolvido no método que estou usando?Esta revisão, portanto, tem por objetivo abordar diversos aspectos dos métodos espectrofotométricos utilizados para a determinação de proteínas totais em diferentes meios.As proteínas desempenham papéis extremamente importantes, na maioria dos processos biológicos, atuando como enzimas, hormônios, neurotransmissores, transportadores através das membranas celulares e outros 1,2 .O desenvolvimento de metodologias para determinar proteínas tem, cada vez mais, se tornado de fundamental relevância em várias áreas do conhecimento, como por exemplo, em análises clínicas 1 , favorecendo o diagnóstico de certas doenças correlacionadas com a alteração da quantidade de proteínas nos fluidos biológicos; em nutrição animal 3 , ressaltando o aproveitamento racional de nutrientes; em problemas relacionados à nutrição humana 1,4,5 , como obesidade, anorexia nervosa, desnutrição, devendo as dietas apresentar teor balanceado de proteínas; em tecnologia e ciências de alimentos 6 , objetivando o aproveitamento racional da matéria prima e o melhoramento dos produtos novos e já existentes; em ecologia 7 , relacionando o comportamento alimentar com a quantidade de proteína ingerida dos alimentos, favorecendo o entendimento dos vários aspectos da vida dos animais silvestres; e na área de química de proteínas objetivando purificar novas proteínas e enzimas 8 .Estas são apenas algumas das mais importantes aplicações analíticas para metodologias de determinação de proteínas totais; obviamente, existem muitas outras de grande relevância.Os métodos para a determinação da concentração de proteí-nas totais são muito variados, no entanto, as metodologias mais utilizadas são as espectrofotométricas no ultra-violeta e no visível (UV-Vis). MÉTODOS ESPECTROFOTOMÉTRICOS MAIS UTILIZADOS PARA A DETERMINAÇÃO DE PROTEÍNAS TOTAISMuitos métodos espectrofotométricos, ao longo dos anos, têm sido propostos para a determinação de proteínas totais, mas não existe uma metodologia considerada de uso universal para todos ...

show abstract

Section: Aplicaçõesunclassified

Section: Interferentesunclassified

See 2 more Smart Citations

Determinação de proteínas totais via espectrofometria: vantagens e desvantagens dos métodos existentes

Zaia

Lichtig

1998

Quím. Nova

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Recently two dye-binding methods have been introduced for urinary total protein assays that claim a high sensitivity and approximately equal response for both albumin and IgG-a modified Bradford method 46,47 using Coomassie Blue G250 dye and a Pyrogallol Red-Molybdate'v" method. It follows that proteins could be 'derivatized' by these reagents, the excess reagent removed by desalting and the proteins chromatographed as their dye complexes.…”

Section: Dye-bindingmentioning

confidence: 99%

Analysis of Urinary Proteins by Liquid Chromatography

Baer¹,

Hjelm²

1994

Ann Clin Biochem

View full text Add to dashboard Cite

Development of a new method for measuring total urinary protein using acid violet 6B pigment

Iijima¹,

Cho²,

Sakai³

et al. 2003

Clinical Laboratory Analysis

View full text Add to dashboard Cite

We have developed a new method for measuring total urinary protein using acid violet 6B (AV6B) pigment. Nine purified components of human urinary proteins and urine samples collected randomly from 123 diabetic outpatients were used. There were 62, 36, and 25 cases of prenephropathy, early nephropathy, and overt nephropathy, respectively. All samples were measured by Coomassie brilliant blue G 250 (CBB), pyrogallol red-molybdate (PRM), and AV6B methods using an optical photometer. In healthy subjects, the major components of urinary proteins, such as gamma-globulins, IgG, IgA Tamm-Horsfall protein, and transferrin, the reactivity values of the AV6B and PRM methods were similar. The CBB method was the least sensitive of the three methods. In the urine samples from diabetic patients, the urinary protein values measured by the AV6B method were higher than those measured by the CBB method in the prenephropathy stage. The values obtained by the AV6B method (y) correlated well with those from the CBB method (x) (y=1.243x+3.61, r=0.904). When the values from the AV6B method (y) were compared to those from the PRM method (x), correlation was low (y=1.406x-29.15, r=0.786). In conclusion, the AV6B method was more useful than the CBB and PRM methods for low levels of urinary protein.

show abstract

Evaluation of an improved coomassie dye binding method for urinary protein assay

Cited by 21 publications

References 13 publications

Determinação de proteínas totais via espectrofometria: vantagens e desvantagens dos métodos existentes

Determinação de proteínas totais via espectrofometria: vantagens e desvantagens dos métodos existentes

Analysis of Urinary Proteins by Liquid Chromatography

Development of a new method for measuring total urinary protein using acid violet 6B pigment

Contact Info

Product

Resources

About