Fundamento: Os efeitos da caminhada de longa distância sobre o sistema cardiovascular são pouco estudados. Objetivos: O objetivo geral deste estudo foi verificar esses efeitos sobre o comportamento da função diastólica e dos biomarcadores cardíacos CK-MB (massa), troponina T e NT-proBNP em atletas amadores. Método: Este estudo longitudinal realizado em 2015 avaliou os participantes nas 5 etapas seguintes: A0 (basal) antes de iniciar o percurso, e as demais, A1, A2, A3 e A4 ao final de cada dia, totalizando 244,7 km. Em todas as etapas foram dosados os biomarcadores NT-proBNP, CK-MB (massa) e troponina T. Realizou-se ecocardiograma para análise das ondas E, A e E'. Adotado p < 0,05 como significativo. Resultados: Foram avaliados 25 participantes com média de idade de 46 ± 10,5 anos e índice de massa corporal de 20,2 ± 2,3 kg/m2. Encontrou-se aumentos dos valores de NT-proBNP de A0 para A1, A2, A3 e A4 (p < 0,001), CK-MB (massa) de A0 para A2 (p < 0,001) e da onda E' de A0 para A1, A2, A3 e A4 (p < 0,001). Foram identificadas correlações entre os seguintes: CK-MB (massa) e troponina T (A1