Experimental Substantiation of the Possibility to Use Finite Cell Line CHO-K1 for Determination of Specific Activity of Components of Chemical Cholera Vaccine

Abstract

цель-экспериментально обосновать возможность использования перевиваемой линии клеток сно-к1 для определения специфической активности холерного токсина и компонента вакцины холерогена-анатоксина в процессе производства холерной химической вакцины. материалы и методы. в исследованиях использовали перевиваемую линию клеток сно-к. учет результатов метода биоиндикации на перевиваемой клеточной линии проводили визуально с помощью инвертированного микроскопа и фотометрически в колориметрическом тесте для оценки метаболической активности клеток при длине волны 595 нм. результаты и обсуждение. предлагаемый метод позволяет определить активность продукции токсина у штамма Vibrio cholerae 569B при глубинном культивировании в биореакторе и специфическую активность холерогена-анатоксина по анатоксиносвязыванию с использованием клеточных культур. результаты коррелируют с данными, полученными при использовании методов внутрикожной пробы по крейгу, GM1-иФа и рпиг. введение в практику метода клеточных культур может обеспечить существенное сокращение использования животных на этапах производства вакцины холерной бивалентной химической. Ключевые слова: холерная химическая вакцина, культура клеток сно-к1, холерный токсин, холерогенанатоксин.

Assessment of Stability of Chemical Cholera Vaccine in a New Primary Packaging

“…ранее нами показана возможность оценки специфической активности готовой лекарственной формы вакцины и ее специфических компонентов методом дот-иммуноанализа с использованием конъюгата на основе стафилококкового белка а, меченного коллоидным золотом (диа знч) [7,8] таким образом, в результате проведенной работы доказана стабильность свойств илп «вакцина холерная бивалентная химическая», серий 012-017, в полимерных банках и традиционной стеклянной таре (по 150 таблеток) в течение срока наблюдения (3 года). установлено, что хранение экспериментальных серий 012-014 вакцины холерной в новой первичной упаковке не привело к изменению качества препарата в течение срока наблюдения (3 года), что согласуется с результатами теста «ускоренного старения» на примере образцов серий 09-011. установлена возможность использования нового методического подхода на основе дот-иммуноанализа с использованием конъюгата на основе стафилококкового белка а, меченного коллоидным золотом, для мониторинга стабильности готовой лекарственной формы вакцины по показателю «специфическая активность».…”

Experimental Substantiation of Feasibility of Using Enzymatic Fibrin Hydrolyzate-Based Medium to Obtain Components of Chemical Cholera Vaccine

“…разработана питательная среда на основе сухого гидролизата фибрина (ФгФ) для культивирования холерных вибрионов и получения биомассы [7]. кроме того, ранее авторами экспериментально обосновано применение данной питательной среды для получения холерного токсина [8]. учитывая высокую эффективность питательной среды на основе ФгФ для культивирования штаммов V. cholerae -продуцентов протективных антигенов, а также актуальность внедрения малоотходных технологий, перспективным является применение данной питательной среды для получения компонентов, использующихся в производстве вакцины холерной бивалентной химической, таблеток, покрытых кишечнорастворимой оболочкой.…”

Investigating the stability of the Properties of Vibrio cholerae strains – Producers of Active Components of the Chemical Cholera Vaccine

“…методы атомносиловой микроскопии (асм) и световой и электронной трансмиссивной микроскопии (тэм) позволяют оценить морфологические и механические параметры бактерий [4]. методом дот-иммуноанализа с золотыми наночастицами (диа-знч) доказана возможность оценки активности антигенов с первого часа культивирования холерного вибриона [5].…”