RESUMO Toxoplasma gondii é um protozoário de parasitismo intracelular obrigatório, capaz de infectar diversas espécies de hospedeiros vertebrados, incluindo o homem. Infecções por T. gondii manifestam-se, em geral, de forma assintomática em macacos do Velho Mundo, de forma que a suscetibilidade ao agente e a sua patogenicidade sejam similares ao que ocorre na espécie humana. O caráter oportunista do agente, assim como para a espécie humana, também se aplica ao T. gondii no caso de infecções em macacos do Velho Mundo, pois condições que favoreçam o estabelecimento de estado imunossupressivo podem predispor estes animais à toxoplasmose aguda. O presente trabalho teve como objetivo realizar a investigação sorológica para a infecção por T. gondii em macacos Rhesus mantidos em uma colônia no Município de São Paulo. Foi comparado o desempenho de duas técnicas sorológicas, a reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e a reação de aglutinação com antígenos modificados (MAT). Dos resultados, desprende-se que a prevalência da infecção é de 17,5% e 20,0% quando determinada pelo MAT e RIFI, respectivamente. As análises estatísticas indicam inexistência de diferença entre os resultados das provas. Aspectos relacionados à ocorrência e transmissão da toxoplasmose na colônia em tela são discutidos.