Expresión de Citocinas Pro-Inflamatorias de Leucocitos de Alpaca (Vicugna pacos) Inducidos por el Extracto de Macroquistes de Sarcocystis aucheniae

Abstract

El objetivo del trabajo fue determinar la expresión de citocinas pro-inflamatorias de leucocitos de alpaca mediante el enfrentamiento antigénico de extracto de macroquistes de Sarcocystis aucheniae a diversas dosis y tiempos de exposición. Se empleó una concentración de leucocitos de 500 000/ml expuestos a 0.5, 1, 50, 500 y 1000 ng de extracto de macroquistes de S. aucheniae e incubados por 1, 12 y 24 h. Se extrajo los ARN mensajeros (ARNm) totales de cada tratamiento con Trizol y se utilizaron en una RT-PCR tiempo real con cebadores específicos de la citosina TNF-α e interleucinas IL-1α, IL-1β e IL-6. Se observó que los niveles de ARNm de IL-1α y TNF-α generados a 1 h de incubación eran detectables y comparativamente elevados con respecto al calibrador (leucocitos no expuestos a extracto). La IL-1β se encontró incrementada en la concentración de 1 ng/ml a las 24 h, mostrando una cinética de expresión negativa en comparación con el control no tratado. La IL-6 no se evidenció mediante RT-PCR tiempo real. Asimismo, se realizó la observación de viabilidad leucocitaria a los tiempos de 1, 12 y 24 h permitiendo corroborar el efecto tóxico del extracto de macroquistes de S. aucheniae a altas concentraciones.

Efecto in vitro del Extracto Proteico de Macroquistes de Sarcocytis aucheniae sobre la Viabilidad y Degranulación de Leucocitos de Conejo (Oryctologus cuniculus)

“…La expresión de la inmunidad depende de la actividad de las células T que colaboran con la producción de anticuerpos neutralizantes contra los esporozoitos, así como también la liberación de linfocinas para inhibir la multiplicación de las fases intracelulares, tratando de conseguir la disminución de los síntomas clínicos y la reducción del número de ooquistes (Urquhart et al, 2001). Hinostroza et al (2015) demostraron que el extracto de macroquistes de S. aucheniae a dosis de 0.5, 1, 50, 500, 1000 ng/ml a 1, 12 y 24 h de incubación in vitro con leucocitos circulantes de alpaca indujo una respuesta inflamatoria evidenciada por la detección y cuantificación relativa de las citoquinas proinflamatorias IL-1α, IL-1β, IL-6 y TNF-α.…”