Fehleranalyse der periungualen Videokapillarmikroskopie

Abstract

EinleitungAuflichtmikroskopisch lassen sich die Kapillaren der Haut darstellen und mittels Videosystem aufzeichnen. Da die Kapillaren an der Nagelfalz parallel zur Hautoberfläche verlaufen, kann die Bewegung der Erythrozyten von Videobild zu Videobild in den Kapillaren nachverfolgt und so die Erythrozytengeschwindigkeit quantifiziert werden. Der technische Fehler und die biologische Variabilität der Erythrozytengeschwindigkeit in Nagelfalzkapillaren wird im folgenden analysiert. Alle Untersuchungen werden an gesunden Probanden durchgeführt, um Veränderungen der Meßgrößen bei Langzeituntersuchungen durch die Progredienz von Erkrankungen, wie dies bei der Untersuchung von Patientenkollektiven auftreten könnte, auszuschließen. MethodenDie Messung der Erythrozytengeschwindigkeit erfolgt in der frame-to-frame Technik. Die Geschwindigkeitsmessungen werden circa 100 [ ] vom Kapillarscheitel entfernt in einem Bereich von ± 50 vorgenommen. Die mittlere Erythrozytengeschwindigkeit wird als zeitlicher (10 Messungen/Minute über 3 Minuten) und räumlicher Mittelwert (4 Kapillaren) gebildet Technische Daten des Videomikroskopes Das verwendete Gesamtsystem besteht aus einem Auflichtmikroskop mit Grob-und Feintrieb, einem Objektiv (Neofluar 6,3/0,20), einem Optovar 1,0-2,0, einer Kaltlichtquelle mit Grünfilter und Wärmefilter, einer Videokamera mit Newvicon-Röhre, einem Videotimer, einem Videorecorder und einem Monitor. Die Beleuchtung der Nagelfalz wird mit zwei flexiblen Lichtleitern unter 45° vorgenommen. Je nach Einstellung des Optovars beträgt die Endvergrößerung 285-bis 570-fach. Auflichtmikroskop: Als Auflösungsgrenze b wird der kleinste Abstand bezeichnet, den zwei Punkte haben dürfen, wenn sie noch getrennt wahrgenommen werden sollen. Den Zusammenhang beschreibt Gleichung 1: b = 0,61 *l/(n*sina) 1 Damit löst ein Mikroskop mit hoher numerischer Apertur bis zu etwa b=l/2 oder circa 0,24 [ ] auf. Im vorliegenden Fall mußte, in erster Linie wegen des gewünschten großen Arbeitsabstandes und der Beleuchtung im Auflicht, ein Objektiv mit einer Apertur von 0,20 eingesetzt werden. Dementsprechend beträgt die Auflösung des Mikroskopes b=1,464 [ ]. Videokamera: Die verwendete Standardvideokamera mit Newvicon Röhre liefert im s/w-Bild 300 Linienpaare /ideobild bzw. 150 Linienpaare pro Halbbild (Standbild) bei 450 Linienpaaren/Zeile. Bei einer Gesamtvergrößerung von 1:570 werden auf dem Monitor vertikal 490 [ ] abgebildet, in horizontaler Richtung 630 [//m]; dies ergibt eine horizontale Auflösung von 1,4 \ \] und eine vertikale Auflösung von 0,784 [f/m], im Standbild von 1,568 \ \]. Bei einer Bildfrequenz von 50 Halbbildern pro Sekunde liegt jeweils nach 20 [ms] ein neues Videobild vor; die zeitliche Auflösung beträgt demnach 20 [ms]. Lichtquelle: Es muß beachtet werden, daß eine Kaltlichtquelle mit Wärmefilter eingesetzt wird, um eine Aufheizung des Untersuchungsgebietes während der Aufnahme zu vermeiden. Nach einstündiger Beleuchtung auf einer hellen reflektierenden Unterlage ergibt sich eine Erwärmung von 0,6 [°C] t auf einer dunk...

Intravital microscopy of the capillary perfusion in the corium limbi of the third toe of the minipig

“…This finding also applies to the difference in diameters of the arterial and venous capillary branches of approx. 30% [12]. Capillary densities (minipig: 8.2 capillaries per mm; human: 8.9 capillaries per mm [13]), ranging between 8 and 9 capillaries per mm, were also comparable and correlated very well with the minimum capillary density found for other mammals with spatial intervals of about 100 µm between each capillary [3], which is regarded as sufficient to provide the surrounding tissue with oxygen via diffusion.…”

“…Since only the erythrocytes are visible due to the absorption of green light by hemoglobin, it is not possible to determine capillary diameters by non-invasive intravital microscopy [12]. Erythrocyte column diameters, however, were almost identical (minipig: 13.3 ± 2.1 µm; human: 14.0 ± 3.2 µm [13]).…”

Effect of Ioxaglate on the cutaneous microcirculation in patients with coronary artery disease: Randomized, double blind, placebo-controlled study

“…Intraindividual variability of v RBC under resting conditions over one day was examined in 8 apparently healthy subjects [19]. The coefficient of variation (CV) of v RBC in nailfold capillaries under resting conditions was CV = 23.4% ± 7.8%.…”

“…There were no significant differences between the four samples (p > 0.05). The intraindividual variability of v RBC under resting conditions from day to day was examined in nine apparently healthy subjects [19]. v RBC was measured on five consecutive days in one week at the same time [8 a.m.].…”

“…The intraindividual variability of v RBC under resting conditions over one year was examined in eleven apparently healthy subjects [19]. v RBC was measured every month for one year at the same time every 1st Monday (8 a.m.).…”