Fibroblastos geneticamente modificados para estimular angiogênese e vasculogênese em miocárdio isquêmico

Abstract

Sumário 3.3. Cultura primária de fibroblastos cardíacos e de músculos esqueléticos de ratos adultos 36 3.4. Cultura primária de mioblastos de músculos esqueléticos de ratos adultos 38 3.5. Infecção Celular 38 3.6. Fluorescência 39 3.7. Enzyme-linked immunoabsorbent assay (ELISA) 39 3.8. Ensaio de imunofluorescência para detecção das proteínas hVEGF e hIGF-1 em fibroblastos cardíacos modificados com os respectivos vetores virais 40 3.9. Ensaio Colorimétrico 42 3.10. Implante celular 42 3.11. Dosagem da atividade da enzima β-galactosidase 44 3.12. Lesão miocárdica por isquemia seguida de reperfusão-Experimento 1 ("Proof of Principle")-Teste de fisibilidade. 46 3.13. Lesão miocárdica por Ligadura permanente-Experimento 2-Teste de eficácia terapêutica. 47 3.14. Estudo morfológico por ecocardiograma 47 3.15. Estudo hemodinâmico da função cardíaca 49 3.16. Avaliação Morfométrica 50 3.17. Ensaio imunohistoquímico para detecção das proteínas hVEGF e hIGF-1 em tecidos de corações de rato 51 Sumário 3.18. Determinação de densidade capilar 53 3.19. Ensaio de imunofluorescência para detecção de vasculogênese em tecidos de corações de rato 53 3.20. Determinação da área de infarto e da área de colágeno 54 3.21. Extração de RNA 55 3.22. Transcrição Reversa (RT) 56 3.23. Reação de Polimerização em Cadeia (PCR) 57 3.24. Polímero de fibrina autólogo-Autologous fibrin polymer (fibrin sealant)-utilizado no Experimento 2-Teste de eficácia terapêutica.