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RESUMOO cultivo in vitro de orquídeas possibilita elevadas porcentagens de germinação, quando comparadas a germinação natural dessas espécies, pois suas sementes possuem pouca ou nenhuma reserva nutritiva. Objetivou-se avaliar diferentes volumes de suspensão de sementes na propagação in vitro de Dendrobium nobile Lindl. var. nobilius e var. comet king em meio alternativo, sem subcultivos. Foram utilizadas 0,02 g de sementes de cada planta e desinfestadas em solução de hipoclorito de sódio a 0,8%, por 15 minutos, sendo diluídas em água estéril até completar 60 mL. Em ambiente asséptico, procedeu-se a semeadura in vitro. Foram pipetados 2, 3 ou 4 mL de cada suspensão de sementes em frascos de vidro de 600mL providos de tampa metálica e contendo 80 mL do meio de cultura alternativo. As culturas foram transferidas para sala de crescimento com temperatura e fotoperíodo controlados (25 ± 2 ºC; 16 horas) permanecendo por seis meses nessas condições. O maior número de sementes potencialmente viáveis (426 mg -1 ) foi observado em D. nobile var. nobilius, enquanto D. nobile var. comet king apresentou 164 mg -1 sementes potencialmente viáveis. A variedade nobilius apresentou maiores resultados no número de plantas total e de plantas vivas, número de folhas, número e diâmetro de pseudobulbos e comprimento da maior raiz, característica dessa variedade, que é mais vigorosa. A inoculação de 2mL foi mais eficiente para a micropropagação das duas plantas, havendo menos concorrência entre as plântulas no frasco. Palavras-chave:Inoculação, micropropagação, Orchidaceae. SEED QUANTITY ON IN VITRO CULTIVATION OF Dendrobium nobile LINDL. IN ALTERNATIVE CULTURE MEDIA WITHOUT SUBCULTURE ABSTRACTThe in vitro orchid cultivation results in high percentages of germination when compared to the natural germination of these species, because their seeds have few or any nutritional reserves. The objective of this study was to evaluate different amounts of seeds in the in vitro propagation of Dendrobium nobile Lindl. var. nobilius and var. comet king in alternative medium, without subcultures. 0.02 g of seeds of each plant were used and disinfested in 0.8% sodium hypochlorite solution for 15 minutes, being diluted in sterile water until 60 mL was reached. In the aseptic environment, in vitro seeding was carried out 2, 3 or 4 mL of each seed suspension were pipetted into 600 mL glass vials provided with a metal stopper and containing 80 mL of the alternative culture medium. The cultures were transferred to the growth room with controlled temperature and photoperiod (25 ± 2 ºC, 16 hours) remaining for
RESUMOO cultivo in vitro de orquídeas possibilita elevadas porcentagens de germinação, quando comparadas a germinação natural dessas espécies, pois suas sementes possuem pouca ou nenhuma reserva nutritiva. Objetivou-se avaliar diferentes volumes de suspensão de sementes na propagação in vitro de Dendrobium nobile Lindl. var. nobilius e var. comet king em meio alternativo, sem subcultivos. Foram utilizadas 0,02 g de sementes de cada planta e desinfestadas em solução de hipoclorito de sódio a 0,8%, por 15 minutos, sendo diluídas em água estéril até completar 60 mL. Em ambiente asséptico, procedeu-se a semeadura in vitro. Foram pipetados 2, 3 ou 4 mL de cada suspensão de sementes em frascos de vidro de 600mL providos de tampa metálica e contendo 80 mL do meio de cultura alternativo. As culturas foram transferidas para sala de crescimento com temperatura e fotoperíodo controlados (25 ± 2 ºC; 16 horas) permanecendo por seis meses nessas condições. O maior número de sementes potencialmente viáveis (426 mg -1 ) foi observado em D. nobile var. nobilius, enquanto D. nobile var. comet king apresentou 164 mg -1 sementes potencialmente viáveis. A variedade nobilius apresentou maiores resultados no número de plantas total e de plantas vivas, número de folhas, número e diâmetro de pseudobulbos e comprimento da maior raiz, característica dessa variedade, que é mais vigorosa. A inoculação de 2mL foi mais eficiente para a micropropagação das duas plantas, havendo menos concorrência entre as plântulas no frasco. Palavras-chave:Inoculação, micropropagação, Orchidaceae. SEED QUANTITY ON IN VITRO CULTIVATION OF Dendrobium nobile LINDL. IN ALTERNATIVE CULTURE MEDIA WITHOUT SUBCULTURE ABSTRACTThe in vitro orchid cultivation results in high percentages of germination when compared to the natural germination of these species, because their seeds have few or any nutritional reserves. The objective of this study was to evaluate different amounts of seeds in the in vitro propagation of Dendrobium nobile Lindl. var. nobilius and var. comet king in alternative medium, without subcultures. 0.02 g of seeds of each plant were used and disinfested in 0.8% sodium hypochlorite solution for 15 minutes, being diluted in sterile water until 60 mL was reached. In the aseptic environment, in vitro seeding was carried out 2, 3 or 4 mL of each seed suspension were pipetted into 600 mL glass vials provided with a metal stopper and containing 80 mL of the alternative culture medium. The cultures were transferred to the growth room with controlled temperature and photoperiod (25 ± 2 ºC, 16 hours) remaining for
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