Genotoxicidad del nifurtimox en deferentes líneas celulares utilizando el ensayo cometa

Abstract

ResumenEl nifurtimox es un 5-nitrofurano sintético utilizado en el tratamiento de la enfermedad de Chagas. El objetivo de este estudio fue determinar la toxicidad celular y el daño del ADN causado por el nifurtimox en células Vero, J774, NIH/3T3 y THP-1. Se utilizó la coloración vital con azul tripan y el método colorimétrico MTT para determinar la toxicidad y el ensayo cometa alcalino para determinar el daño al ADN. Los cometas fueron contados en un microscopio de fluorescencia y el porcentaje de daño total del ADN fue calculado y clasificado de 0 (sin daño) a 4 (daño severo). En el ensayo de toxicidad, las células J774 fueron las líneas celulares más sensibles y las células THP-1 las menos sensibles al nifurtimox con valores de CC 50 34,04-138,58 µg/ml y CC 90 130,58->300 µg/ml de nifurtimox, respectivamente. En el ensayo cometa, el porcentaje de daño total de ADN a 100 µg/ml de nifurtimox fue 79,75%, 85,30% y 10,25% en células NIH/3T3, J774 y THP-1 respectivamente. En las células Vero el daño del ADN fue del 80% en células tratadas y no tratadas. El nifurtimox presentó toxicidad y genotoxicidad con actividades que dependieron del tipo de célula y de la concentración del medicamento utilizada. Es importante tomar en cuenta estas diferencias al realizar conclusiones finales de resultados obtenidos utilizando estos ensayos, especialmente el ensayo cometa.Palabras clave: nifurtimox; citotoxicidad; genotoxicidad; ensayo cometa; líneas celulares. Genotoxiciyt from Nifurtimox in comet assay AbstractNifurtimox is a synthetic 5-nitrofuran used in treating Chagas disease and potentially genotoxic in experimental models. The aim of this study was to determine the cell toxicities and DNA damage caused by nifurtimox on Vero, J774, NIH/3T3 and THP-1 cells. Vital trypan blue staining and MTT colorimetric test for cell toxicities and alkaline comet assay for DNA damage were performed. Comets were counted under fluorescent microscope and the % of DNA damage was calculated and scored from 0 (no damage) to 4 (high damage). J774 cells was the more sensitive and THP-1 cells the less one with values of CC 50 34.04-138.58µg/ml and CC 90 130.58->300 µg/ml. At a dose of 100 µg/ml of nifurtimox, DNA damage was 79.75, 85.30 % and 10.25% on NIH/3T3, J774 and THP-1 cells respectively. Vero cell showed 80% DNA damage in both treated and untreated cells. Both, cell toxicity and DNA damage were dependent on cell type and drug concentration. It is important to take these variables into account for final conclusions when these types of assays, especially comet assay are performed.Key words: nifurtimox; cytotoxicity; genotoxicity; comet assay; cell lines. IntroducciónEl nifurtimox (3-metil-4-(nitrofurfurilidenamina)-tetrahidro-4H-1,4-tiazina-1,1-dioxido, Lampit®, Bayer) es un 5-nitrofurano sintético utilizando en el tratamiento de enfermedades producidas por tripanosomas como la enfermedad de Chagas (Tripanosomiasis americana). La enfermedad de Chagas es una enfermedad sistémica compleja que afecta más de 7 millones de personas resultando en a...

Synthesis, Characterization, and Antibacterial Activity of Silver Nanoparticles Supported on Bovine Bone Powder Using Heterotheca inuloides: An In Vitro Study

“…The MTT results were used as an indication of ROS production because the mechanism of action of silver nanoparticles is through the disruption of the cell membrane, the internment of the nanoparticles into the cytoplasm, and their interaction with the cell nucleus causing DNA destruction. In addition, the formation of free radicals, both ROS and RNS, causing oxidative stress and damage to cellular macromolecules (carbohydrates, lipids, proteins, and nucleic acids) also occurs [64].…”