Introdução: Na intensidade do limiar de lactato (LL2) ocorre um aumento da atividade do sistema nervoso simpático, aumento das catecolaminas plasmáticas e da glicemia, que representam o limiar glicêmico (LG) e o segundo limiar de variabilidade da frequência cardíaca (LVFC2). Esses limiares podem apresentar concordância e permitir a prescrição do exercício por meios mais acessíveis. Objetivo: O objetivo do estudo foi analisar a validade concorrente do limiar glicêmico com o limiar de lactato; e sua concordância como o limiar de variabilidade da frequência cardíaca para identificação do segundo limiar anaeróbio. Métodos: 31 homens saudáveis e ativos (22 ± 2 anos) foram submetidos a um protocolo escalonado de Teste Cardiopulmonar de Exercício (TCPE), monitorados por medidas de glicemia, lactacemia e variabilidade da frequência cardíaca para a identificação do LG, LL2 e LVFC2. O coeficiente de correlação intraclasse (CCI), erro típico (ET), coeficiente de variação (CV) e Bland-Altman testaram a confiabilidade e concordância. Resultados: A HR apresentou boa confiabilidade (ICC = 0,80) e boa exatidão (ET = 4,7% e CV = 6,6%) para o LG com LL2. Para o LG e LVFC2, a FC apresentou confiabilidade moderada (ICC = 0,60) e boa precisão (ET = 5,9% e CV = 8,4%). Conclusão: O LG e o LL2 apresentaram validade concorrente para identificação do segundo limiar anaeróbio. A concordância entre o LG e o LVFC2 é reforçada pelos eventos fisiológicos que os relacionam.