High-sensitivity express immunochromatographic method for detection of plant infection by tobacco mosaic virus

Abstract

A highly sensitive express immunochromatography method for molecular diagnosis of plant virus infections was elaborated on the example of a model object - tobacco mosaic virus (TMV). The analysis time does not exceed 5 min, and the lower limit of TMV detection in non-clarified leaf extract (2-4 ng/ml) is comparable with the sensitivity of the enzyme-linked immunosorbent assay of the virus. A single measurement requires 0.1-0.2 ml tested solution (extract from 10-20 mg of leaf material). The sensitivity of TMV determination in the leaf tissue extract was increased by more than one order of magnitude using signal enhancement by silver and is 0.1 ng/ml. In this case, analysis time did not exceed 25 min. The simplicity of this method makes it especially convenient in express diagnosis of numerous analyzed specimens. The prototype of a diagnostic kit for serial analyses of plant viral infections both in laboratory and field conditions was elaborated.

Molecular diagnostics of potato infections with PVY and PLRV by immunochromatography

“…Ранее нами было описано применение имму-нохроматографического анализа для определения ВТМ [11] и обнаружения вируса Х картофеля [12].…”

“…Препарат коллоидного золота получали вос-становлением золотохлористоводородной кислоты цитратом натрия [11]. Определение среднего раз-мера частиц коллоидного золота проводили на про-свечивающем электронном микроскопе Jeol 1400 (Jeol, Япония) при ускоряющем напряжении 100 кэВ.…”

“…Иммобилизацию антител к вирусам на поверхности частиц коллоидного золота прово-дили по методике, описанной нами ранее [11].…”

“…), позволяющих проводить анализ путем простого визуального счи-тывания. Например, чувствительность определения вируса табачной мозаики в неосветленном соке листьев табака, разбавленном в 10 раз, составляет 1 нг/мл, а полное время анализа -2 мин [11].…”

Gold Nanoparticles in Biology and Medicine: Recent Advances and Prospects

“…1A ). Scanning probe microscopy [12] ( Fig. 1B ), scanning electron microscopy [13], and fluorescence microscopy [14] are frequently used for the same purpose.…”