Recebido em 11/5/05; aceito em 27/10/05; publicado na web em 31/3/06 ASSESSMENT OF CATALYTIC PROPERTIES IN AQUEOUS AND ORGANIC MEDIA OF LIPASE FROM Candida rugosa IMMOBILIZED ON WOOD CELLULIGNIN ACTIVATED WITH CARBONYLDIIMIDAZOLE. Microbial lipase from Candida rugosa was immobilized by covalent binding on wood cellulignin (Eucaliptus grandis) chemically modified with carbonyldiimidazole. The immobilized system was fully evaluated in aqueous (olive oil hydrolysis) and organic (ester synthesis) media. A comparative study between free and immobilized lipase was carried out in terms of pH, temperature and thermal stability. A higher pH value (8.0) was found optimal for the immobilized lipase. The optimal reaction temperature shifted from 37 °C for the free lipase to 45 °C for the immobilized lipase. The pattern of heat stability indicated that the immobilization process tends to stabilize the enzyme. Kinetics tests at 37 °C following the hydrolysis of olive oil obeyed the Michaelis-Menten rate equation. Values for K m = 924.9 mM and V max = 198.3 U/mg were lower than for free lipase, suggesting that the affinity towards the substrate changed and the activity of the immobilized lipase decreased during the course of immobilization. The immobilized derivative was also tested in the ester synthesis from several alcohols and carboxylic acids.Keywords: cellulignin; lipase; immobilization.
INTRODUÇÃOOs processos que utilizam lipases são especialmente atraentes em função das diferentes aplicações desta enzima. As lipases podem catalisar reações de hidrólise, esterificação e interesterificação, com extrema simplicidade de processo, qualidade superior do produto final e excelente rendimento 1-3 . Estas características conferem às lipases um potencial biotecnológico comparável ao das proteases e carboidrases -enzimas industrialmente utilizadas -estimulando pesquisas para otimização da sua produção, caracterização, imobilização e aplicação industrial 2,3 .Idealmente os sistemas catalisados por lipases devem ser tratados caso a caso e as generalizações devem ser praticadas com cautela 2 . Portanto, a seleção das condições adequadas na catálise enzimática em meios não convencionais deve seguir uma cuidadosa manipulação do meio-ambiente do biocatalisador, de tal forma que a produtividade do sistema seja maximizada por meio da potencialidade total da atividade enzimática 2 . Isto pode ser alcançado pela utilização de solventes apropriados 4,5 , controle do teor de água no meio reacional 6,7 e imobilização da enzima em suportes sólidos [8][9][10] . A imobilização tem efeito benéfico na estabilidade da enzima, em função das interações físicas e químicas entre o suporte e as molécu-las da enzima. A imobilização também auxilia na dispersão homogênea da enzima no meio, o que é essencial para a condução de reações enzimáticas 9,10 .As propriedades dos derivados imobilizados são influenciadas tanto pelas propriedades da enzima como pelo material do suporte 2,11 . A interação entre esses dois componentes proporciona um derivado imobilizado...