Rev. bras. hematol. hemoter. 2005;27(1):12-15 Bonini-Domingos CR et al
Artigo / ArticleFreqüência da mutação 844ins68 do gene da cistationina β β β β β-sintetase em pacientes com trombose venosa profunda Frequency of the 844ins68 mutation on the cystathionine β β β β β-synthetase gene in deep venous thrombosis patients Claudia 2212392; Fax (17)2212390 E-mail: laboratorio_hgdh@yahoo.com.br; WebSite: www.lhgdh.ibilce.unesp.br 13 Bonini-Domingos CR et al Rev. bras. hematol. hemoter. 2005;27(1):12-15 Introdução A homocisteína é um derivado da metionina cuja concentração é influenciada por fatores genéticos, nutricionais e patológicos. A hiper-homocisteinemia, mecanismo de hipercoagulabilidade, resulta de alterações funcionais das enzimas envolvidas no metabolismo da metionina ou da deficiência de co-fatores enzimáticos como as vitaminas B6 e B12 e o ácido fólico. Entre as causas hereditárias da hiperhomocisteinemia destacam-se a deficiência funcional da cistationina β-sintetase (CBS) e a variante termolábil da metileno tetra-hidrofolato redutase (MTHFR).
1,2,3A deficiência na conversão da homocisteína em cistationina constitui fator de risco isolado para doenças vasculares, incluindo a doença arterial coronariana, 4,5 o tromboembolismo venoso 6,7 e o acidente cerebral vascular.
8Estudos de meta-análi-se têm reforçado a importância da hiper-homocisteinemia como fator de risco para o tromboembolismo venoso. 9,10,11 Embora o diagnóstico laboratorial da hiperhomocisteinemia possa ser realizado por imunoensaio ou cromatografia, as alterações nos genes CBS e MTFHR somente podem ser analisadas por métodos moleculares.
12Diante da importância que tem sido atribuída à hiper-homocisteinemia como fator de risco para doenças tromboembólicas, o objetivo deste estudo foi avaliar a freqüência da mutação 844ins68 do gene da cistationina β-sintetase em pacientes com trombose venosa profunda, da região noroeste do estado de São Paulo.
Casuística e MétodoPara verificar a freqüência da mutação 844ins68 no éxon 8 do gene da cistationina β-sintetase foram avaliados em estudo caso-controle, 95 pacientes com trombose venosa profunda, e um grupo controle com 95 doadores de sangue de São José do Rio Preto, sem história familiar prévia de trombose venosa, com sexo, grupo étnico e idades pareados aos do grupo de estudo. Como critério de inclusão dos pacientes foi adotada a presença de trombose venosa profunda confirmada pelo dúplex ou flebografia. Foram excluídos os pacientes que apresentaram fatores de risco conhecidos como a imobilização, cirurgias, traumas e uso de anticoncepcional. Todos os participantes expressaram consentimento livre e esclarecido e declararam a sua ancestralidade quanto à etnia a ser considerada.Foram coletados cinco mL de sangue venoso, com o uso de anticoagulante EDTA, de cada participante. O DNA foi extraído dos leucócitos pelo mé-todo DTAB e CTAB.
13A detecção da mutação 844ins68 do gene da cistationina β-sintetase consistiu na amplificação de segmento gênico por PCR, com iniciadores que flanqueiam a...