Inicio meus agradecimentos dedicando a Deus toda minha gratidão por seu imenso amor que tem me sustentado em todos os dias da minha vida.Agradeço ao meu orientador Prof. Dr. Júlio César Borges pela oportunidade e pela confiança depositada em mim para a realização deste projeto, também sou grata por sua disponibilidade e atenção às minhas dúvidas durante este período.Agradeço imensamente aos meus colegas de laboratório M.Sc Amanda, Carlos, Dra. Noeli e M.Sc Vanessa; por tudo que me ensinaram na bioquímica e fora dela, pelas palavras de encorajamento e pela companhia nos longos experimentos, simplesmente para me apoiar. Vocês são incríveis! Nunca vou me esquecer do quanto me ajudaram. Agradeço também às Pós Doutorandas Dra. Silvia e Dra. Milene que me ensinaram muito sobre química e bioquímica, mas me ensinaram ainda mais sobre humildade, responsabilidade, amor e compromisso com a ciência. Admiro muito vocês meninas! Aqui agradeço ao apoio das pessoas mais importantes da minha vida: minha família! Aos meus pais, Isaac e Luciana, à minha irmã, Gabrieli, e à minha avó, Aparecida que sempre me apoiaram em toda a minha carreira acadêmica comemorando cada pequeno passo em rumo aos meus sonhos. Eu amo vocês! Também agradeço aos meus tios, Alberto e Silvana, à minha priminha, Lavínia, e aos meus sogros, Silvana e Marcos, pelo cuidado, encorajamento e por suas orações por mim. Agradeço especialmente ao meu marido, Cainã, por permanecer me protegendo e sempre me ajudando a me reerguer, acreditando em mim mais do que eu mesma. Sem você, meu amor, eu não teria sido capaz. O presente trabalho foi realizado com apoio do CNPq, Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico -Brasil -Código de Financiamento 130998/2019-2."Telle est bien la beauté et la noblesse de la science : désir sans fin de repousser les frontières du savoir, de traquer les secrets de la matière et de la vie sans idée préconçue des conséquences éventuelles" (CURIE, 1938)
ResumoAs chaperonas moleculares ou Heat shock proteins (Hsps) da família Hsp70 atuam em diversos compartimentos celulares cooperando para a manutenção da proteostase celular. Dentre elas, a HSPA9 (Hsp70 mitocondrial humana) tem sido amplamente estudada como alvo molecular pela gama de funções que exerce, principalmente na mitocôndria, e sua correlação com doenças neurodegenerativas e na apoptose celular. Entretanto, devido à sua tendência à autoagregação, sua manutenção estrutural e funcional depende da interação com a Hsp70 escort protein 1 (Hep1), uma cochaperona pequena, conservada em eucariotos, que a mantém solúvel tanto in vivo, como in vitro. Além da manutenção à solubilidade, a Hep1 humana (hHep1) apresenta uma capacidade de estímulo à atividade ATPásica da HSPA9 e interação com outras HSPAs (Hsp70 de humanos). Este trabalho desenvolveu uma caracterização estrutural e funcional comparativa da hHep1 com uma mutante, cujos terminais N e C foram truncados, denominada hHep1_core. Esta construção mantém o motivo zinc finger e resíduos que já se mostraram essenciais à interaç...