Identificação de receptores do tipo Nod (NLRs) em placas de ateroma humano e investigação do papel inflamatório do NLRP3 e IL-1 beta

Abstract

Dedico esta dissertação às pessoas mais importantes da minha vida: meus pais, Arthur e Ada, e Tiago. Cada um em um momento, em um vagão.x xi AGRADECIMENTOS AgradeçoAos meus pais, Arthur e Ada, pelo amor e apoio incondicionais, mesmo nos momentos de despedida com lágrimas nos olhos. Nossa família é meu porto-seguro.Ao meu irmão, Otávio, que sempre me desejou e deseja "boa viagem" cheio de carinho.Apesar de não ser bom com palavras, sei que ele sempre torceu por mim.À Profª Drª Maria Heloisa de Souza Lima Blotta, por me acolher no laboratório e se tornar mais que uma orientadora, mas uma amiga. Tão doce e tão marcante, foi um grande exemplo de comprometimento e dedicação.Ao Dr. Rômulo Tadeu Dias de Oliveira, meu maior professor no laboratório, que me acompanhou em todos os acertos e erros da bancada e da vida de mestranda.Ao Tiago, meu melhor encontro e minha fonte inesgotável de amor, parceria, compreensão, paciência e troca do que acreditamos ser a verdadeira sabedoria. Ao Dr. Fábio Hüsseman Menezes, que gentilmente cedeu as amostras de lesão aterosclerótica.Aos pacientes que autorizaram a coleta do sangue e das amostras de lesão aterosclerótica.À Rosiane Maria da Silva, pelos ensinamentos em imuno-histoquímica, pelo cuidado no processamento das amostras, pelas marcações e lindas fotos.À Profª Drª Wirla Maria da Silva Cunha Tamashiro, querida professora dos tempos de IB, orientadora da iniciação científica e que, com certeza, foi fundamental para meus primeiros passos "imunológicos".Ao Dr. Ronei Luciano Mamoni, pelos ensinamentos e exemplo de dedicação e disciplina. xii À Xinaida, Fernanda e Eliane pela amizade verdadeira, sorriso sincero e olhar tranquilizante. E pela companhia no bandeijão, claro.Aos amigos do laboratório, alguns não mais presentes, Carol, Larissa, Rosiane, Munir, Fábio, Lívia e Liana, pelos momentos de descontração e boas risadas. E também pela doação de tubos de sangue.Aos meus queridos familiares uberlandenses que sempre esperavam pelo meu retorno de braços abertos.À Fapesp e ao CNPq pela ajuda financeira. xiii "I hope to do it better in time. I myself am very far from satisfied with this but, well, getting better must come through doing it and through trying." (Vincent van Gogh) xiv xv RESUMO A presença de IL-1 e IL-18 em lesões ateroscleróticas e o importante papel dessas citocinas na ativação endotelial, recrutamento celular e na polarização para a resposta T H 1 constitui indício indireto do envolvimento dos NLRs na patogênese da aterosclerose.Nesse trabalho investigamos a presença do RNAm e proteína de diversos NLRs, AIM2, caspase-1, proteína adaptadora ASC e IL-1 em placas ateroscleróticas humanas.Observamos que amostras de ateroma de pacientes assintomáticos apresentaram maior expressão relativa do RNAm de NLRP1, 2 e 3, NLRC2, 3, 4 e 5, NAIP e ASC. A presença de fatores de risco não promoveu diferenças na expressão gênica do RNAm para nenhum deles. A marcação por imuno-histoquímica revelou a presença de NLRP1, 3, AIM-2, NLRC2, 3 e 5 e caspase-1, especialmente em macrófagos, células ...