Identificación y caracterización de proteínas específicas del nematode parásito Dioctophyme renale

Abstract

La Dioctofimosis es una enfermedad parasitaria causada por el nematode gigante Dioctophyme renale cuya prevalencia está incrementando en América del Sur debido a condiciones climáticas cambiantes. Esta es una parasitosis de ciclo indirecto que tiene como huéspedes definitivos a diferentes mamíferos carnívoros tanto domésticos como salvajes y al hombre. La infección con D. renale determina la destrucción total del parénquima de uno de los riñones del hospedador definitivo, siendo letal en el caso de una reinfección. En Argentina, se encuentra generalmente en perros de zonas ribereñas y su diagnóstico resulta del análisis de orina, ecografías, maniobras quirúrgicas o necropsias siendo estas técnicas poco eficientes para la detección de estadios tempranos de la enfermedad. Por otra parte, D. renale es representante del Clado I del Phylum Nematoda (donde también se incluyen Trichuris trichura y Thrichinella spiralis), el cual está poco representado no solo en número de especies descriptas sino también en estudios genómicos. El presente trabajo tiene como objetivo iniciar una caracterización molecular y bioquímica de D. renale con la finalidad de profundizar en aspectos biológicos, evolutivos y bioquímicos de este organismo. En este trabajo hemos demostrado que el líquido pseudocelómico de especímenes adultos de D. renale contiene dos proteínas en alta concentración, una de 44 kDa (P44) que une lípidos, y otra de 17 kDa (P17) de color rojo. El análisis de identidad aminoacídica proveniente de distintas regiones de ambas proteínas demostró que P44 sería una proteína Clado específica mientras que P17 formaría parte del grupo de las nemoglobinas. Estudios preliminares de inmunoreactividad mostraron que P44 es inmunogénica mientras que P17 no lo es. Adicionalmente, mediante el análisis de marcadores moleculares cuantificamos la diversidad genética de individuos de D renale presentes en la región encontrando diferencias nucleotídicas en genes mitocondriales y nucleares respecto a los aislamientos reportados en otras regiones del mundo. Más aun, hemos realizado el análisis genómico y proteómico de este parásito. Los resultados obtenidos demuestran que D. renale es indudablemente miembro del clado I del phylum nematoda mostrando caracteres moleculares y mecanismos que son propios de este grupo. Dentro de estas características surgen posibles cadidatos para inmunodiagnostico asi como posibles blancos terapéuticos.