Immortalization of bovine umbilical vein endothelial cells: a model for the study of vascular endothelium

Cajero-Juárez, Marcos; Avila, Bibiana; Ochoa, Alejandra; Garrido-Guerrero, Efraín; Varela‐Echavarría, Alfredo; Escalera, Gonzálo Martínez de la; Clapp, Carmen

doi:10.1078/0171-9335-00213

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“…Bovine umbilical vein endothelial cells (BUVECs) obtained as previously described (Cajero-Juárez et al, 2002), were cultured in F12K medium with 10% FBS and 50 U/ml penicillin-streptomycin. Proliferation assays were carried out as reported (Gonzalez et al, 2004).…”

Section: Endothelial-cell-proliferation Assaymentioning

confidence: 99%

Matrix metalloproteases from chondrocytes generate an antiangiogenic 16 kDa prolactin

Macotela

Aguilar

Guzmán-Morales

et al. 2006

Journal of Cell Science

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The 16 kDa N-terminal fragment of prolactin (16K-prolactin) is a potent antiangiogenic factor. Here, we demonstrate that matrix metalloproteases (MMPs) produced and secreted by chondrocytes generate biologically functional 16K-prolactin from full-length prolactin. When incubated with human prolactin at neutral pH, chondrocyte extracts and conditioned medium, as well as chondrocytes in culture, cleaved the Ser155-Leu156 peptide bond in prolactin, yielding - upon reduction of intramolecular disulfide bonds - a 16 kDa N-terminal fragment. This 16K-prolactin inhibited basic fibroblast growth factor (FGF)-induced endothelial cell proliferation in vitro. The Ser155-Leu156 site is highly conserved, and both human and rat prolactin were cleaved at this site by chondrocytes from either species. Conversion of prolactin to 16K-prolactin by chondrocyte lysates was completely abolished by the MMP inhibitors EDTA, GM6001 or 1,10-phenanthroline. Purified MMP-1, MMP-2, MMP-3, MMP-8, MMP-9 and MMP-13 cleaved human prolactin at Gln157, one residue downstream from the chondrocyte protease cleavage site, with the following relative potency: MMP-8>MMP-13 >MMP-3>MMP-1=MMP-2>MMP-9. Finally, chondrocytes expressed prolactin mRNA (as revealed by RT-PCR) and they contained and released antiangiogenic N-terminal 16 kDa prolactin (detected by western blot and endothelial cell proliferation). These results suggest that several matrix metalloproteases in cartilage generate antiangiogenic 16K-prolactin from systemically derived or locally produced prolactin.

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Section: Endothelial-cell-proliferation Assaymentioning

confidence: 99%

Matrix metalloproteases from chondrocytes generate an antiangiogenic 16 kDa prolactin

Macotela

Aguilar

Guzmán-Morales

et al. 2006

Journal of Cell Science

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“…Adicionalmente se observó, que las células de esta línea celular muestran diversos tamaños. No obstante, las células en general son muy grandes, en comparación con otras líneas celulares, como lo son BUVEC E 6 E 7 (15,20) y DH82 (7,8) , mismas que tienen una forma uniforme y un tamaño inferior al de las células de la línea RF/6A.…”

Section: Discussionunclassified

“…Additionally, it was observed that cells from this cell lineage show different sizes. Nonetheless, cells in general are very big, in comparison with other cell lines, such as BUVEC E 6 E 7 (15,20) and DH82 (7,8) , cell lines that are uniform in shape and have an inferior size, in contrast to RF/6A cell line.…”

Section: ** Derived From Rhesus Monkey Fetus (Macaca Mulatta)mentioning

confidence: 99%

Propiedades de crecimiento de las líneas celulares DH82 y RF/6A bajo condiciones normales de laboratorio

Figueroa

Colín

Camarillo

et al. 2016

Rev. Mex. Cienc. Pecu.

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RESUMENLa línea celular RF/6A ha sido utilizada en estudios de corto plazo evaluando fármacos o infecciones experimentales con Anaplasma marginale; en contraste, DH82 es utilizada para la multiplicación de Ehrlichia canis. No obstante, se desconocen condiciones específicas de su crecimiento, por lo que se diseñaron varios experimentos para resolver interrogantes de su propagación. Ambas líneas, se adquirieron de la American Type Culture Collection, mantenidas en Medio Mínimo Esencial suplementado con suero fetal bovino, piruvato de Na y NaHCO 3 e incubadas en atmósfera de 5% de CO 2 en aire, a 37 °C. Los primeros ensayos, en placas de 24 pozos, esclarecieron los valores de dosis mínima inicial, que fueron 62,500 y 8,836 células/pozo para DH82 y RF/6A; así como los de densidad de siembra; cultivos con concentraciones

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“…Por otro lado, la línea celular BUVEC E6E7 fue desarrollada para estudios de fisiología celular (4) , y con la intención de seguir utilizándola para realizar estudios de invasión por la rickettsia entre otros, se necesita información relativa a su desarrollo en condiciones in vitro no clarificadas anteriormente, para su manipulación en el laboratorio. El objetivo consistió en determinar el tiempo de duplicación de la línea celular BUVEC E6E7 en las condiciones de laboratorio.…”

Section: Introductionunclassified

“…En el Cuadro 3 se resume la información numérica utilizada para aplicación de la fórmula de determinación del tiempo de duplicación derivados del tercer experimento, así como sus valores de R 2 con base en su línea de tendencia exponencial en congruencia con la fórmula indicada, mostrando un alto grado de paralelismo. * Línea celular derivada del endotelio del cordón umbilical de un bovino, transformada con el oncogene E6E7 del virus del papiloma humano (4) . § DT = T ln2/ln(Xe/Xb).…”

Section: Introductionunclassified

Determinación del tiempo de duplicación in vitro de la línea celular BUVEC-E6E7 de origen bovino

Cárdenas¹,

Estrada²,

Quiroz-Castañeda³

et al. 2017

Rev. Mex. Cienc. Pecu.

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Resumen:Se ha sugerido que la rickettsia Anaplasma marginale podría interactuar con células endoteliales en el huésped bovino. La línea celular BUVEC E6E7 de origen bovino se utilizó en ensayos previos para intentar reproducirla sin éxito. En parte debido a la carencia de información de sus propiedades de crecimiento in vitro. Con este propósito se plantearon experimentos que procuraran información útil en la aplicación del procedimiento. Las células se obtuvieron del Instituto de Neurobiología/UNAM, fueron mantenidas en Medio F-12 (HAM) suplementado con suero fetal bovino y NaHCO3 e incubadas a 37 °C en atmósfera de 5% CO2 en aire saturado de humedad. El primer ensayo en placas de 24 pozos, se diseñó para determinar la dosis mínima para empezar un cultivo, resultando el valor de 2,500

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Immortalization of bovine umbilical vein endothelial cells: a model for the study of vascular endothelium

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Matrix metalloproteases from chondrocytes generate an antiangiogenic 16 kDa prolactin

Matrix metalloproteases from chondrocytes generate an antiangiogenic 16 kDa prolactin

Propiedades de crecimiento de las líneas celulares DH82 y RF/6A bajo condiciones normales de laboratorio

Determinación del tiempo de duplicación in vitro de la línea celular BUVEC-E6E7 de origen bovino

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