Immunohistochemistry of fumonisin in poultry using avidin-biotin-peroxidase system

Abstract

Using monoclonal anti-fumonisin B1 antibody (anti-FB1) and avidin-biotin-peroxidase system, liver and kidneys of broiler chicks were evaluated for the detection and distribution of fumonisins (FBs). One hundred and fifty micrograms of FB1 or culture extract of Fusarium moniliforme str. 113F containing 150 microg of FB1 and 4 microg of FB2 were administered into the vitelline sac of 1-day old, specific pathogen-free chicks. The animals were killed 24 h after injection, and renal and hepatic tissues submitted for immunohistochemical analysis. FBs were detected in the epithelial cells of convoluted distal and proximal tubules of the kidneys, as well as in the cytoplasm of hepatocytes. This novel immunohistochemical method developed is expected to be an efficient way for monitoring the target of the FB toxins in tissues.

Metodologias analíticas para a determinação de biomarcadores de fumonisinas em amostras biológicas

“…A técnica da avidina-biotina-peroxidase consiste numa combinação de técnicas anatómicas, imunológicas e histoquímicas que permite a localização de antigénios específi cos em estruturas de tecidos defi nidas. Foi desenvolvida uma reacção específi ca entre a FB 1 -anticorpo monoclonal e o sistema avidina-biotina-peroxidase para demonstrar a presença de FBs em células hepáticas e renais de aves, tendo permitido melhorar o diagnóstico patológico de lesões agudas e subagudas [26]. Através da utilização de anticorpos monoclonais anti-FB 1 e do sistema avidina-biotina-peroxidase, o fígado e rins de frangos Leghorn brancos, aos quais foi administrada FB 1 e FB 2 , foram analisados por Buim et QUÍMICA 106 nomeadamente no que diz respeito à adição de NH 4 OH à amostra [14,32].…”

“…A detecção por espectrometria de massa (LC-MS) [9,22] tem como vantagem não requerer derivatização. A cromatografi a em camada fi na (TLC) [19], os métodos imuno-histológicos [26] e os radioactivos [18] são também reportados, embora menos usados.…”

“…Sewram et al[22] e Meyer et al[9] usaram eluição em gradiente. Assim, os primeiros autores, Condições cromatográfi cas por LC para a determinação de bases esfi ngóides em amostras biológicas -Informação não disponível al [26]. com o objectivo de detectar e conhecer a distribuição de FBs.…”