In Vitro Transformation of Root meristem to Shoot and Plantlets in Vanilla planifolia

Genetic fidelity of long‐term micropropagated shoot cultures of vanilla (Vanilla planifolia Andrews) as assessed by molecular markers

“…these cuttings; therefore, micropropagated plantlets have gained importance in the vanilla cultivating areas. In vitro propagation of vanilla has been established by culturing axillary buds [2,3] aerial root tips [4], through callus [5] and protocorms. Micropropagation using shoot tips or nodal segments has been found as an appropriate technique in which about 10 5 plantlets may be obtained in 15 sub cultures [2].…”

Propagación Masiva Y Formación De Callos Protocórmicos De Vainilla a Partir De Ápices Radicales Vanilla Mass Propagation and Protocormic Callus Formation From Root Tips

“…El efecto de la consistencia del medio de cultivo se evaluó midiendo el crecimiento de los precallos de vainilla en los medios de cultivo sólidos y líquidos. La formación de los precallos de vainilla se evaluó colocando los ápices radicales de forma invertida (geotropismo negativo) en el respectivo medio sólido, tal como se menciona en Philip & Nainar (1988a). Para la prueba en medio líquido no se toma en cuenta el efecto del geotropismo negativo de las raíces por la consistencia evidente de este medio.…”

“…Las pruebas en medios líquidos se realizaron bajo agitación constante a 110 revoluciones por minuto (rpm) con la ayuda de un agitador orbital de plataforma marca Hotech®, modelo 721-2T (Hotech Instruments Corp., New Taipei City, Taiwán). El medio de cultivo basal sólido suplementado con 1 mg/L de BAP se utilizó como testigo debido a que se ha utilizado rutinariamente en el Laboratorio de Biotecnología de Plantas (Escuela de Agronomía, Instituto Tecnológico de Costa Rica, Sede San Carlos), para la inducción de PLBs (protocorm like bodies), esto de acuerdo a la metodología descrita por Philip & Nainar (1988a). A todos los medios de cultivo se les agregó 30 g/L de sacarosa y 1 g/L de caseína hidrolizada CH (Phyto Technology Laboratories, Shawnee Mission, Kansas, USA) a un pH de 5.7.…”

“…Al modificar las condiciones de cultivo y el medio de cultivo los precallos formados pueden tomar dos vías diferentes, formar PLBs o bien callos protocórmicos, estos últimos se definirán y describirán posteriormente. Philip & Nainar (1988a) constataron que al sembrar ápices de raíz de vainilla en un medio líquido MS suplementado con 2 mg/L de AIA y 0.2 mg/L de kinetina durante un periodo de 30 días, se generó la desintegración de la caliptra y el número de células en la región del centro quiescente se incrementa considerablemente dando como resultado una estructura de aspecto semiesférico que presenta un ensanchamiento en el área del ápice.…”

“…Se han desarrollado diferentes metodologías de micropropagación para V. planifolia, muchas de estas metodologías están enfocadas a la producción de brotes y PLBs (protocorm like bodies) a partir de ápices, nodos y yemas axilares (Divakaran, et al, 2006;Kalimuthu et al, 2006;Gantait et al, 2009;Zuraida et al, 2013;de Oliveira et al, 2013;Jing et al, 2014;Ramos-Castella et al, 2014;Jadid et al, 2015, Biradar et al, 2016Ayele et al, 2017), por medio de microestacas (Kononowicz & Jarrick, 1984;Geetha & Shetty, 2000), o bien a partir de ápices radicales (Philip & Nainar, 1988ay 1988bPierik, 1990, Zuraida et al, 2013; en tanto que otras metodologías han generado la inducción de callos, en general con porcentajes bajos de formación, como un medio para la reproducción clonal y obtención de plantas de esta especie (Davidonis & Knorr, 1991;Janarthanam & Seshadri, 2008;Tan et al, 2011;Palama et al, 2010). George & Ravishankar (1997) determinaron que la combinación de medio líquido y medio sólido favorece la multiplicación de brotes en V. planifolia.…”