In vivo and in vitro Models for Scanning Drug Substances in Malaria: Prestudy

Abstract

Sıtmada Etken Madde Taramalarında in vivo ve in vitro Modeller: Pilot ÇalışmaIn vivo and in vitro Models for Scanning Drug Substances in Malaria: Prestudy ÖZ Amaç: Dünya Sağlık Örgütü Plasmodium türlerinin "artemisinin" içeren ilaçlara da dirençli suşlarının ortaya çıkmasıyla tüm ülkeleri "Bir Sonraki Artemisinin Avı'' sloganıyla bitkisel kaynaklı antimalaryal etken maddeleri araştırmaya teşvik etmektedir. Çalışacak genç araştırmacılara rehber olacak şekilde en temel ve basit olarak sıtmanın in vivo ve in vitro modellerinin kurularak ilaç araştırmalarında ve etken madde taramalarında yardımcı olması amacıyla planlanmıştır. Yöntemler: İn vitro çalışmamızda sıvı azot tankından çıkarılarak uygun koşullarda çözdürülen Plasmodium berghei genç trofozoitleri 0.1, 0.4, 0.8, 1.6, 6.4, 12.8 µg/mL konsantrasyonunda klorokin ve tetrasiklin ilaçları ile 24 saat +37°C'de jar içerisinde çalkalamalı etüvde inkübe edilerek takip edilmiştir. İn vivo çalışmalarda Tetrasiklin grubu (TG) ve Klorokin grubuna (KG) intragastrik lavaj yoluyla 50 mg/kg dozunda tetrasiklin ve klorokin oral yolla, tedavi almamış kontrol grubuna (TAKG) aynı miktarda ve yolla serum fizyolojik verilmiştir. Farelerdeki parazitemi 24 gün boyunca takip edilmiştir. Bulgular: İn vitro ilaç çalışmamızda klorokinin 0,8 μg/mL dozda parazitemiyi baskıladığı görülürken, tetrasiklinin 1,6 μg/mL dozda parazitemiyi baskıladığı görülmüştür. İn vivo ilaç çalışmamızda KG grubunda farelerde parazitemi yok olurken TG grubundaki farelerin hepsi 24. günde, TAKG grubundaki farelerin hepsi 12. günde ölmüştür. Sonuç: Çalışmamız, klorokin temini geciktiğinde tetrasiklin tedavisi verilmesi ile paraziteminin ilerlemesinin geciktirilebileceği bu sürede klorokinin temin edilmesiyle ve tedaviye klorokin ile devam edilmesi durumunda hastanın ex olmasının önlenebileceğini düşündürmüştür. Anahtar Kelimeler: Plasmodium, in vitro, in vivo, Manisa, Türkiye Geliş Tarihi: 25.04.2017 Kabul Tarihi: 03.08.2017ABSTRACT Objective: The Wolrd Health Organization (WHO) encourages all countries to investigate antimalarial drug substances derived from herbal sources with the slogan "Hunt of the Next Artemisinin" due to the emergence of resistant strains of Plasmodium species to artemisinin. In the broad and simple sense, it was planned to help guide the young researchers set in-vitro and in-vivo models of malaria in order to be used in drug research and active ingredient studies. Methods: In-vitro study, young Plasmodium berghei trophozoites were removed from the liquid nitrogen tank and resuspended in appropriate conditions, followed by incubation with chloroquine and tetracycline at concentrations of 0.1, 0.4, 0.8, 1.6, 6.4, 12.8 μg/mL for 24 hours at +37°C in a shaking incubator. In-vivo studies, Tetracycline group (TG) and Chloroquine group (KG) were administered 50 mg/kg of tetracycline and chloroquine by intragastric lavage and untreated control group (TACG) were administered the same amount of saline via the same route. The suppression of parasitemia in mice was followed for 24 days.Results: In ...

Kıbrıs Endemik Bitkisi Origanum majorana: Sıtma Tedavisinde Yeni Bir Alternatif Doğal Ürün Olabilir mi?

“…Her biri 8-12 haftalık, yaklaşık 20-25 gram ağırlığında olan dişi Balb/c türü fareler kullanıldı. Tüm gruplardaki fareler standart hayvan yemi ile beslenip, içme suyu olarak temiz çeşme suyu verildi 11 . Fareler, YDÜ Deney Hayvanları Araştırma Merkezinde bulunmaktaydı ve tüm deney süresince hayvan haklarına sadık kalınarak çalışmalar yapıldı.…”

“…Çalışmamızda, her grupta altışar fare olacak şekilde, sıtma referans grubu olan klorokin (Sigma, Saint Louis, MO 63103, ABD) grubu (KG) (50 mg/kg) 11 , tedavi almamış kontrol grubu (TAKG), O.dubium (OD) (100 μg/ml= 20 mg/kg), O.majorana (OM) (100 μg/ml= 20 mg/kg), S.fruticosa (SF) (100 μg/ml= 20 mg/kg) ve L.nobilis (LN) (100 μg/ml= 20 mg/kg) olmak üzere 6 grup oluşturuldu ve toplamda 36 fare ile çalışıldı.…”

“…Son tedaviden 24 saat sonra tüm farelerin kuyruk ucundan kan alınıp, ince damla kan yaymaları hazırlandı. Kan alımına, fareler eksitus olana kadar her iki günde bir olacak şekilde devam edildi 11 .…”

“…Farelerdeki parazitemi hesaplanmasında; 10 alanda 100'er eritrosit sayılıp enfekte eritrositlerin yüzdeleri hesaplanarak toplandı. Elde edilen değer 10 sahanın ortalamasını almak için 10'a bölünüp, farelerdeki ortalama parazitemi yüzdesi belirlendi 11 p= 0.988'dir. Tüm gruplardaki yaşam süreleri ortalamaları arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlı (önemli) bulunmuştur (p≤ 0.001) (Tablo IV).…”