Colorado potato beetle (CPB) (Leptinotarsa decemlineata (Say in Journal of the Academy of Natural Sciences of Philadelphia 3: 298-331, 1824)) (Coleoptera: Chrysomelidae) is one of the most serious potato pests. It has been reported worldwide, from North America to Europe and Asia. In this study we analyzed the genetic diversity of a mitochondrial DNA marker -a second subunit of cytochrome oxidase (mtCOII) in Polish CPB populations to assess the possible changes of this gene sequence over time and over the country, influencing the intra-specific variability of CPB. During a three-year survey in Polish potato fields the beetles were collected from 20 evenly spaced locations of varying climatic and geographic conditions, and the nucleotide sequence of this marker was analyzed. Our research revealed that in spite of three years of sampling the mitochondrial haplotype in all individuals was fixed, and no single nucleotide change was found in any individual, indicating a high stability of this maternally inherited marker in L. decemlineata. This finding about the level of biodiversity is of importance for plant protection strategies.Resumen El escarabajo de la papa de Colorado (CPB) (Leptinotarsa decemlineata (Say in Journal of the Academy of Natural Sciences of Philadelphia 3: 298-331, 1824)) (Coleoptera: Chrysomelidae) es una de las plagas más serias en papa. Se ha reportado en todo el mundo, desde Norteamérica a Europa y Asia. En este estudio analizamos la diversidad genética de un marcador de ADN mitocondrial -una segunda subunidad de citocromo oxidasa (mtCOII) en poblaciones polacas de CPB para ver los posibles cambios en la secuencia de este gene en el tiempo y en el país, que estuvieran influenciando la variabilidad intraespecífica del CPB. Durante los tres años del estudio en los campos de papa polacos se colectaron los escarabajos de veinte localidades espaciadas uniformemente de condiciones climáticas y geográficas variables, analizando la secuencia de nucleótidos de este marcador. Nuestra investigación reveló que a pesar de los muestreos por tres años, el haplotipo mitocondrial era fijo en todos los individuos, y no se encontró un solo cambio de nucleótido en ningún individuo, indicando una gran estabilidad de este marcador heredado maternalmente en L. decemlineata.