Investigação laboratorial dos efeitos antioxidantes do plasma processado autólogo nas principais enfermidades articulares de equinos após tratamento artroscópico

Abstract

Palavras-chave:Equino. Líquido sinovial. Hemoderivado. Estresse oxidativo. Plasma processado autólogo. As a cursorial animal, the horse relies on soundness to fully accomplish daily life activities and survival. Horses' natural ability for movement justifies breeding and training investments, and is explored to its maximum during athletic activities. Articular disorders, such as osteoarthritis and osteochondrosis, with their potential to reduce physical performance, are a therapeutic challenge. Autologous haemoderivates have appeared as safe and accessible options for the management of these conditions, but their widespread use has outpaced scientific evidence regarding mechanisms of action and ideal methods for preparation and administration. The antioxidant properties of autologous processed plasma, previously demonstrated in vitro on stimulated equine synovial fluid cells, posed a question on whether these effects would occur in vivo. Therefore, the present study aimed to verify autologous processed plasma´s effects in osteoarthritic and osteochondritic joints, when administered at the end of the arthroscopic procedure, with particular emphasis on possible antioxidant attributes. The study also aimed to detect evidences of oxidative stress in these disorders, what could further justify its use. For this purpose, synovial fluid was obtained immediately before the beginning of the surgery, and analyzed to yield an oxidant/ antioxidant, physical, cellular, molecular and inflammatory profile of osteoarthritis and osteochondrosis. After the end of the procedure, one group of horses received the intraarticular medication and another group of untreated horses served as controls. Forty-eight hours after surgery synovial fluid was retrieved from operated joints, and a second analysis was performed. Physical and cellular analyses were conducted immediately after sample collection and the supernatant was stored at -80º C for further evaluations. These consisted in catalase, superoxide dismutase, glutathione peroxidase, total antioxidant capacity, vitamin E, protein carbonyl groups, chondroitin sulphate, hyaluronic acid, prostaglandin E 2 , total protein and urea determinations.Osteoarthritic joints revealed greater activation of antioxidant defense systems, enzymatic and non-enzymatic, with greater activity of catalase, and greater concentrations of vitamin E, respectively, when compared to osteochondritic joints. Additionally, these joints had higher total nucleated cell counts and prostaglandin E 2 and total protein concentrations, revealing a more inflammatory profile when compared to that of osteochondritic joints. Nonetheless, in osteochondritic joints synovial fluid and matrix components degradation was more pronounced, as there were higher concentrations of chondroitin sulphate and hyaluronic acid in synovial fluid obtained from these joints. Results also showed the occurrence of oxidative stress, 48 hours after the arthroscopic procedure, through higher catalase activity in synovial fluid, reflecting activation ...

>b<Avaliação do queratam sulfato e ácido hialurônico presentes no líquido sinovial como biomarcadores das principais enfermidades articulares em equinos>/b<

“…Anatomicamente, os locais predispostos apresentam padrão vascular distinto, resultando no atraso da ossificação endocondral (MARTEL et al, 2016a A detecção precoce de OC em cavalos tem sido relatada pela mensuração de biomarcadores séricos, sinoviais e sanguíneos (BILLINGHURST et al, 2004;CHIARADIA et al, 2012;DE GRAUW et al, 2011;DONABEDIAN et al, 2008), havendo correlação com aumento nas concentrações séricas de osteocalcina, bem como os produtos séricos do metabolismo do colágeno e da mineralização óssea, apresentando também correlação positiva com a severidade da OC quando combinados com exames radiográficos (BILLINGHURST et al, 2004;DONABEDIAN et al, 2008). Os biomarcadores sinoviais associados com a OC em potros são produtos do turnover do colágeno e agrecam (BROSSI, 2014;DE GRAUW et al, 2011;LAVERTY et al, 2002 • Grupo Fratura -45 articulações cárpicas de 22 equinos, machos e fêmeas, com idade entre dois e seis anos, diagnosticados com fratura intra-articular durante treinamento ou corrida e submetidos a artroscopia (Quadro 1).…”

“…Não houve diferença estatística no percentual de AH de baixo peso molecular (0 a 1000 kDa) entre os grupos (p>0,05). Já a porcentagem de AH de médio peso molecular (1000-2000 kDa) do grupo controle foi significativamente menor em relação aos grupos Fraturas, OA1, OA3 e OC (p<0,05 A graduação da OA tem sido realizada em alguns trabalhos com a intenção de melhorar a compreensão sobre os estágios iniciais da doença (BERTUGLIA et al, 2016a;BOYCE et al, 2013;MANINCHEDDA et al, 2015;NEUNDORF et al, 2010;SILVA, 2014 (BROSSI, 2014;MACHADO et al, 2012;MIYAKOSHI et al, 2017;WRIGHT, 2014).…”

“…Considerando que a força mecânica na superfície articular é importante fator predisponente da OA (FRAZER et al, 2017;MCCARTY et al, 2016), a vulnerabilidade das articulações MCF e MTF é justificada pela sua baixa capacidade de dissipação de energia, uma vez que apresentam alta densidade celular na camada superficial da cartilagem (NOVAKOFSKI et al, 2015). No grupo com OC, por outro lado, houve predomínio das articulações TT e MTF, corroborando com as informações descritas pela literatura para as condições osteocondrais juvenis (BOADO; LOPEZ-SANROMAN, 2016;BROSSI, 2014;DENOIX et al, 2013b;DESJARDIN et al, 2014;EKMAN;CARLSON, 2015; WRIGHT; MINSHALL, 2014). Existem divergências em relação à prevalência desta artropatia na articulação FTP, pois enquanto alguns autores afirmam a alta frequência de acometimento (HILLA; DISTL, 2013), outros dizem ser um local de rara casuística (BOADO; LOPEZ- SANROMAN, 2016;VAN GREVENHOF et al, 2009).…”

“…O uso de anfotericina B na indução da sinovite é descrito por Barrachina et al (2016), que observaram aumento da contagem de células nucleadas até 15 dias após estimulo. Alta concentração de leucócitos no LS de animais com artropatias é relatado por alguns autores (BROSSI, 2014;MACHADO et al, 2012). Neste caso, a quebra da molécula de agrecam por ação de mediadores inflamatórios (FRISBIE et al, 2008;HUI et al, 2012;NEUNDORF et al, 2010;THORNTON;CLEGG, 2016) (MCILWRAITH, 2005;SHAH et al, 2017;EGAN;WANG, 2015).…”

“…Algumas teorias defendem a ideia de que as alterações metabólicas decorrentes da inflamação são capazes de reduzir a síntese do agrecam (LITTLE et al, 1997;SKIÖLDEBRAND et al, 2001) 2013) e da baixa degradação cartilagínea nesta enfermidade (BROSSI, 2014;LAVERTY et al, 2002). Embora Garvican et al (2008) tenham observado menor síntese de proteoglicanos pelos condrócitos na OCD, a expressão do agrecam não apresentou diferença entre as cartilagens saudáveis e doentes (SEMEVOLOS et al, 2001;MIRAMS et al, 2009).…”