Isolation and Characterization of Gyroxin From Crotalus Durissus Terrificus Venom

Barrabin, Héctor; Martiarena, J.L.; Vidal, Juan C.; Barrio, A.

doi:10.1016/b978-0-08-022640-8.50017-2

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“…Em doses maiores, desenvolve um comportamento semelhante ao rolar de um barril; remetendo aos casos em que ocorrem lesões no labirinto. BARRABIN et al (1978) monitoraram as eluições das cromatografias, em diferentes etapas de purificação, com a absorvância em 280 nm e com medidas das atividades enzimáticas em diversos substratos, tais como lecitina, caseína, cálcio bis (p-nitrofenilfosfato); p-nitrofenilfosfato e tosil-arginina-metilester ou com os cofatores AMP e FAD. Estes autores observaram que a atividade esterásica acompanhava a giroxina em todos os perfis de eluição.…”

Section: Sua Presença No Veneno Deunclassified

“…Este inibidor requer um ambiente específico no sítio de ligação do substrato (que determina a orientação da ligação do inibidor) e a presença de um resíduo de histidina, o qual é irreversivelmente modificado pelo grupo clorometilcetona do reagente. Com este experimento (BARRABIN et al, 1978), verificaram que a atividade TAME-esterásica e o rolamento em barril foram irreversivelmente inativados pela reação com TACK em baixas concentrações (10 -5 a 10 -6 molL -1…”

Section: Figura 1 Distribuição Geográfica Da Espécie Crotalus Durissunclassified

“…Neste estudo o fracionamento do veneno nativo foi iniciado com a coluna de afinidade, específica para serinoproteases ao invés do método tradicional (BARRABIN et al, 1978;ALEXANDER et al, 1988) visto que a proteína de interesse pertence a este grupo, mais de 60% do total de proteínas corresponde à crotoxina (que não interage com esta resina) e a giroxina representa apenas 2,5% do veneno total (CAMILLO et al, 2001).…”

Section: Agregação Plaquetária Em Microplacasunclassified

“…Além disso, a larga distribuição tecidual desses receptores sugere sua importância fisiológica Nos experimentos in vivo para induzir a rotação em barril, a giroxina em geral, é injetada via intravenosa. Já foi demonstrado que este comportamento também pode ser observado após administração intraperitoneal, porém com dose um pouco maior (BARRABIN et al,1978). A via intravenosa é de rápida absorção e o endotélio é o primeiro tecido de contato da giroxina com o organismo.…”

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Mediação dos receptores ativados por proteases (PARs) em atividades biológicas da giroxina

Silva¹

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De fato quebrei a cabeça, mas nunca soube que substância é essa. Sinto, porém, que me faz muita falta -Otto Lara Resende É um erro capital teorizar antes de ter os dados. Insensivelmente, começa-se a distorcer os fatos para adaptá-los as teorias, em vez de fazer com que as teorias se adaptem aos fatos -Conan Doyle (1981) Nada é mais digno de nosso patrocínio que o fomento da ciência e da literatura. O conhecimento é, em todo e qualquer país, a base mais segura da felicidade pública -Politicagens ( À minha Orientadora Doutora Maria Aparecida Pires Camillo pela confiança e dedicação.Ao Doutor José Roberto Rogero por todo apoio e confiança desde a iniciação científica.Ao CNPq pelo apoio financeiro.À Doutora Nanci do Nascimento por todo apoio.À Doutora Olga Zazuco Higa pelo apoio e utilização de alguns equipamentos no laboratório.Á Doutora Lígia Ely Morganti F. Dias, pela utilização de aparelhos e materiais de seu grupo de estudo.Ao Doutor Patrick Jack Spencer por toda ajuda e incentivo.Ao Doutor Paulo Sérgio Cardoso da Silva por todo apoio, amizade e incentivo. Ao Doutor Luis Gonzaga e a Mestre Bianca Zychar, do Laboratório de Fisiopatologia doInstituto Butantan, por disponibilizarem o laboratório nos experimentos de microscopia intravital.Aos meus amigos Rubens Zanatta, Eduardo Moura, Murilo Casare, Vanessa, Larissa, Rosa, Sr. Longino, Dona G, Fernanda Calvo, Priscila Caproni, Jean Queiroz, Brito, Keli, Taís, Renata, Claudinha, Johnny, Camila Yonamine por toda amizade, ajuda e muitos momentos de descontração.Às chocólatras Janaína e Karina Corleto que sempre me extorquiram em troca de discussões filosóficas sobre a vida acadêmica, a vida cotidiana e, também, a vida alheia! Agradeço por todas as broncas e gargalhadas espalhafatosas (preciso mencionar de quem?), foi um grande prazer tê-las por perto durante muitas etapas desse trabalho.Devo um agradecimento especial à minha grande e estimada amiga Natália Malavasi por todo "sangue", digo, apoio nos momentos finais desse trabalho, não teria conseguido sem você! 20 MEDIAÇÃO DOS RECEPTORES ATIVADOS POR PROTEASES (PARs) EM ATIVIDADES BIOLÓGICAS DA GIROXINA RESUMOA giroxina é uma enzima serinoprotease do veneno da cascavel sul-americanaCrotalus durissus terrificus. É uma toxina apenas parcialmente caracterizada e com múltiplas atividades. Atua na coagulação, na diminuição da pressão arterial e induz um comportamento neurotóxico descrito como rolamento em barril. Os mecanismos envolvidos nestas atividades não são conhecidos. Considerando que a giroxina é uma enzima com alto potencial para ser um novo fármaco com aplicações em clínica médica como a trombina, tripsina, ancrod ® , batroxobin ® e calicreína, é importante determinar como a giroxina atua. As análises em eletroforese em gel de poliacrilamida e dicroísmo circular confirmaram a pureza e integridade da molécula.A administração intravenosa em camundongos comprovou a neurotoxicidade (SCH 79797 e tcY-NH 2 , respectivamente). Finalmente, foi demonstrado que a giroxina alterou temporariamente a permeabilidade da barreir...

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Section: Figura 1 Distribuição Geográfica Da Espécie Crotalus Durissunclassified

Section: Agregação Plaquetária Em Microplacasunclassified

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Mediação dos receptores ativados por proteases (PARs) em atividades biológicas da giroxina

Silva¹

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“…Outro componente isolado do veneno, a giroxina (BARRIO, 1961), é um peptídeo trombina-sílime e apresenta atividades amidásica, esterásica e fibrinogenolítica. Em camundongos e ratos é responsável pelo movimento giratório ao longo do eixo longitudinal da cauda destes animais, característico de ação neurotóxica (SEKI et al, 1980;CAMILO et al, 2001).…”

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Estudo dos mecanismos de supressão da resposta imune induzida pela crotoxina do veneno de Crotalus durissus terrificus.

Ricardi¹

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Kinetic characterization of gyroxin, a serine protease from Crotalus durissus terrificus venom

et al. 2012

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This work describes for the first time the characterization of the enzymatic features of gyroxin, a serine protease from Crotalus durissus terrificus venom, capable to induce barrel rotation syndrome in rodents. Measuring the hydrolysis of the substrate ZFR-MCA, the optimal pH for proteolytic cleavage of gyroxin was found to be at pH 8.4. Increases in the hydrolytic activity were observed at temperatures from 25 °C to 45 °C, and increases of NaCl concentration up to 1 M led to activity decreases. The preference of gyroxin for Arg residues at the substrate P1 position was also demonstrated. Taken together, this work describes the characterization of substrate specificity of gyroxin, as well as the effects of salt and pH on its enzymatic activity.

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Isolation and Characterization of Gyroxin From Crotalus Durissus Terrificus Venom

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Mediação dos receptores ativados por proteases (PARs) em atividades biológicas da giroxina

Mediação dos receptores ativados por proteases (PARs) em atividades biológicas da giroxina

Estudo dos mecanismos de supressão da resposta imune induzida pela crotoxina do veneno de Crotalus durissus terrificus.

Kinetic characterization of gyroxin, a serine protease from Crotalus durissus terrificus venom

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