RESUMENEvaluación de efectos difusionales sobre la cinética de hidrólisis de lecitina de soja con fosfolipasa A2.La Fosfolipasa A2, soluble o inmovilizada, libera un mol de ácido graso de la posición C-2 de los fosfolípidos de la lecitina de soja para producir lisolecitinas. Cuando se utiliza la enzima en su forma inmovilizada, la actividad enzimática decrece debido al fenó-meno de transporte de sustrato y de producto. Se evaluaron los efectos de difusión comparando los parámetros cinéticos de la reacción de hidrólisis de lecitina de soja catalizada por fosfolipasa A2 inmovilizada sobre alúmina o sobre DEAE-Sephadex, frente a los de enzima soluble. La disminución de la velocidad de reacción fue cuantificada en presencia de efectos difusionales y se calcularon los factores de eficiencia. .min -1 para la enzima inmovilizada sobre alúmina y sobre DEAE-Sephadex, respectivamente. El factor de eficiencia fue 0.277 para alúmina y 0.376 para DEAE-Sephadex.
PALABRAS-CLAVE: Efectos difusionales -Factor de efectividad -Fosfolipasa A2 inmovilizada -Lecitina de soja -Transporte de masa.
SUMMARYEvaluation of diffusional effects on kinetics of soybean lecithin hydrolysis using A2 phospholipase .Soluble or immobilized A2 phospholipase liberates one mole of fatty acid of the C-2 position in soybean lecithin phospholipids to product lysolecithins. When using the enzyme in its immobilized form the enzymatic activity decreases due to substrate and product transport phenomenon. By comparison of the kinetic parameters of the hydrolysis reaction catalized by A2 phospholipase immobilized on alumina or on DEAE-Sephadex against those of the soluble enzyme, for soybean lecithin hydrolysis reaction, the diffusive effects were evaluated. The decrease of the reaction rate was quantified in presence of diffusive effects and the effectiveness factors were calculated. The Michaelis-Menten kinetic parameters were determined: KM = 8,2.10 -2 mol • l -1 and 5,36.10 -2 mol • l -1 and Vmax = 7,7.10.min -1 and 9,5.10 -5 mol • l -1• min -1 for the enzyme immobilized on alumina and on DEAE-Sephadex, respectively. The effectiveness factors were 0,277 for alumina and 0,376 for DEAE-Sephadex.
KEY-WORDS: Diffusional effects -Effectiveness factor -Immobilized A2 phospholipase -Mass transport -Soybean lecithin.
INTRODUCCIÓNLas enzimas inmovilizadas están generalmente en la superficie interna de los soportes porosos o confinadas en matrices. Las propiedades catalíticas de estas partículas, que contienen enzimas inmovilizadas, dependen de la conjunción de dos factores: i) transporte de sustrato y producto y ii) actividad catalítica de la enzima (Bailey y Ollis, 1986).En estos sistemas, el sustrato debe ser transportado desde el seno del líquido a la superficie del catalizador y si la mezcla está en reposo, el transporte se produce por difusión molecular. Normalmente, el mezclado o flujo de la solución introduce contribuciones de transporte convectivo. Si no existe enzima ocluida en el interior de los poros de la partícula de soporte o si el sustrato no penetra ...
