L’ingénierie des génomes par les TALEN

Dupret, Barbara; Angrand, Pierre‐Olivier

doi:10.1051/medsci/20143002017

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“…Les techniques de modifications du génome (genome editing), permettant de modifier un gène d'intérêt, ont été plus récemment décrites et sont dénommées criblage génétique indirect [24]. Ce sont des techniques utilisant le système des TALE nucléases [52] (➜) et Crispr/Cas9 [24,53] (➜) dont l'efficacité pour générer des mutations est maintenant démontrée. Certaines limitations de ces techniques existent cependant, comme la difficulté de créer des mutations ponctuelles spécifiques ou la génération d'effets hors cibles.…”

Section: Les Modèles D'étude Générés Chez Le Poisson Zèbreunclassified

Le poisson zèbre

Ryckebüsch

2015

Med Sci (Paris)

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> Dans le but de mieux comprendre la complexité des dystrophies musculaires congénitales (DMC) et de développer des stratégies pour les traiter, il est important d'établir de nouveaux modèles de ces maladies. En raison de ses nombreuses caractéristiques, le poisson zèbre est récemment devenu un modèle de choix dans l'étude des DMC. La modélisation de certaines de ces dystrophies dans ce modèle vertébré permet en effet d'obtenir un phénotype plus proche de la maladie humaine que le modèle murin. Ces dernières années, grâce à des moyens techniques innovants, il est devenu possible de cribler rapidement et à grande échelle les pathologies musculaires dans ce modèle. Par ailleurs, les nouvelles techniques de modification du génome du poisson ouvrent la voie vers la création de nouveaux modèles pour analyser les DMC. Cette revue discute des qualités majeures du poisson zèbre pour l'étude des DMC et présente les principaux modèles de dystrophies obtenus dans ce modèle. < chez l'homme, afin de caractériser de nouveaux gènes d'intérêt, de comprendre l'évolution de la maladie et de développer de nouvelles thérapies. Le modèle vertébré du poisson zèbre (Danio rerio) a montré son intérêt dans ces avancées [51] 1 . Dans cette revue, nous décrirons les différents aspects des DMC. Nous énumérerons ensuite les moyens mis en oeuvre pour analyser ces pathologies dans le modèle de choix que représente le poisson zèbre. Nous discuterons enfin de la pertinence de certaines études réalisées avec ce modèle, offrant un intérêt particulier pour la compréhension des DMC. Les dystrophies musculaires congénitalesL'hétérogénéité des DMC est illustrée par la variabilité de leurs signes cliniques, mais également par l'âge d'apparition des premiers symptômes. L'étiologie de ces maladies est diverse et complexe. Des mutations différentes d'un même gène peuvent entraîner des manifestations cliniques très variées, et cela au sein d'une même famille ; à l'inverse, des symptômes similaires peuvent résulter d'altérations génomiques distinctes [3]. Outre la classification clinique, les DMC sont aussi classées selon les déficits moléculaires qui les caractérisent (dystroglycanopathies, laminopathies, etc.)

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Section: Les Modèles D'étude Générés Chez Le Poisson Zèbreunclassified

Le poisson zèbre

Ryckebüsch

2015

Med Sci (Paris)

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“…Dans le cas d'une mutation associée à la mutation NARP (T8993G) [28], il a ainsi été possible de détruire spécifiquement la version mutée et de doubler la proportion d'ADNmt sauvage. Récemment, il a été montré que cette même stratégie pouvait également être appliquée via l'utilisation de TALEN (transcription activator-like effector nuclease) [29] et pouvait induire une diminution du nombre de copies du génome muté, qu'il soit affecté par une large délétion (8483-13459) ou une mutation ponctuelle (G14459A) dans cellules cybrides [30]. Pour cette dernière, une augmentation du niveau d'activité du complexe I a également été observée.…”

Section: Enrichissement En Adnmt Sauvageunclassified

Pathologies de l’ADN mitochondrial et stratégies thérapeutiques

Tonin

Entelis

2014

Med Sci (Paris)

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“…Elle a été sélectionnée par la revue Nature Methods comme la « Méthode de l'année ». Cette nouvelle technologie permettait de cibler des séquences de nucléotides plus facilement qu'avec des nucléases à doigts de zinc [46]. Dès janvier 2013, une autre méthode a cependant émergé à partir de travaux indépendants de plusieurs groupes de recherche.…”

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CRISPR, un système qui permet de corriger ou de modifier l’expression de gènes responsables de maladies héréditaires

Tremblay

2015

Med Sci (Paris)

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Les trois méthodes offrent la capacité aux chercheurs de modifier le génome des plantes, des animaux et même celui des cellules humaines [1]. La technologie CRISPR peut être utilisée en biotechnologie, pour la recherche biomédicale et pour des applications thé-rapeutiques. Elle permet de modifier de façon spécifique la séquence des nucléotides d'un gène, ou d'un élément non codant (comme un microARN), pour les rendre non fonctionnel. Elle permet également d'éliminer ou d'introduire de un à plusieurs milliers de nucléotides afin de corriger une mutation responsable de maladie héréditaire. Les modifications apportées peuvent également conduire à identifier la fonction d'un gène qui est alors rendu non fonctionnel, et à évaluer les conséquences phénotypiques de mutations induites dans des cellules ou des organismes entiers [48].

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L’ingénierie des génomes par les TALEN

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Le poisson zèbre

Le poisson zèbre

Pathologies de l’ADN mitochondrial et stratégies thérapeutiques

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