Laboratory and Clinical Experience with a Monoclonal Antibody-Based Radioimmunoassay for Serum Total Thyroxine

Abstract

The performance characteristics and diagnostic value of a monoclonal antibody-based radioimmunoassay for serum total thyroxine (Mallinckrodt) are described. Between-batch precision (coefficient of Variation) was 10.4% at 87 nmol/1 and 3.3% at 185 nmolA Scatchard analysis revealed a linear plot with a K a of 5.4 x 10 8 1/mol. \ Sensitivity was 4.5 nmol/1 of thyroxine. An association study showed that the assay reached equilibrium well within the specified incubation time. Cross-reaction of triiodothyronine and reverse triiodothyronine in the assay was 0.6% and 25.0% respectively. Analytical recovery was 91-110%. Linearity was well demonstrated but dilutions of a high concentration of thyroxine in serum did not parallel the Standard curve. The correlation coefficient for comparison with a polyclonal antibody assay was 0.95 for 83 patients. The diagnostic accuracy of the monoclonal antibody assay was adequate for most patients with thyroid disease, pregnant women, oral contraceptive users and subjects on thyroxine-replacement therapy. Measurement of total thyroxine by a monoclonal antibody-based method shows no definite advantage over the conventional polyclonal antibody assay. Erfahrungen in Laboratorium undKlinik mit einem Radioimmunassay für das gesamte Thyroxin im Serum auf der Grundlage eines monoklonalen Antikörpers Zusammenfassung: Die Charäkteristika der Durchführung und der diagnostische Wert eines Radioimmunassay mit monoklonalem Antikörper für das gesamte Thyroxin im Serum (Mallinckrodt) werden beschrieben. Die Impräzision von Serie zu Serie beträgt als Variationskoeffizient 10,4% bei 87 nmol/1 und 3,3% bei 185 nmol/1. Die Scatchard-Analyse ergab einen linearen Verlauf mit einem Wert für K a von 5,4 x 10 8 1/mol. Die Empfindlichkeit betrug 4,5 nmol/1 Thyroxin. Eine Bindungsstudie ergab, daß das Gleichgewicht innerhalb der angegebenen Inkubationszeit völlig erreicht wird. Die Kreuzreaktionen von Triiodthyronin und reverse Triiodthyronin betrugen 0,6 bzw. 25,0%. Die analytische Wiederfindung betrug 91-110%. Es konnte völlige Linearität nachgewiesen werden, jedoch ergaben Verdünnungen einer hohen Konzentration von Thyroxin im Serum keinen parallelen -Verlauf mit der Standardkurve. Der Korrelationskoeffizient für ein Vergleichsverfahren mit polykloiiälem Antikörper betrug r = 0,95 (n = 83 Patienten). Die diagnostische Richtigkeit des Radioimmunassay mit monoklonalem Antikörper war für die meisten Patienten mit Schilddrüsenerkrankungen, für Frauen* die orale Kontraceptiva einnahmen oder schwanger waren, sowie Personen unter Thyroxin^Substitution genügend. Die Bestimmung des Gesamtthyroxins unter Verwendung eines monoklonalen Antikörpers zeigt keinen deutlichen Vorteil gegenüber der Verwendung konventioneller polyklonaler Antikörper.