En Colombia la industria avícola ha mostrado un crecimiento constante en los últimos años, sin embargo, conforme con este aumento el uso de antibióticos para mantener la salud animal también ha ido en incremento ocasionando la aparición de cepas resistentes tales como Escherichia coli, Salmonella y Campylobacter generando un problema de salud pública. Múltiples estudios han demostrado que el uso de bacterias ácido lácticas (BAL) con capacidad antimicrobiana puede ser empleadas en alimentación animal, disminuyendo el uso de antibióticos. Para el uso industrial de BAL es necesario encontrar medios de cultivos económicos y adecuados para la recuperación y crecimiento de las cepas. Por lo cual, durante el presente estudio se buscará la concentración adecuada de los sustratos leche de soya, suero de leche, azúcar y salvado de trigo que permitan el crecimiento de BAL aisladas de intestino de gallinas para su posterior uso en alimentación animal. Para esto, se realizaron cinéticas de fermentación a 24 h, tomando la viabilidad de las BAL cada 6 h durante 24 h. Se encontró que la mejor concentración de los sustratos donde se alcanzó una viabilidad similar al medio de cultivo comercial fue 15,76 g/L azúcar, 14,24 g/L suero de leche y 10,00 g/L de leche de soya, lo cual muestra que el uso de sustratos alternativos para la elaboración de medios de cultivo puede ser factible en la producción de BAL.