Amostras de sangue de 99 cães domiciliados foram coletadas no meio urbano (n = 33) e rural (n = 66) do município de Lábrea, estado do Amazonas, Brasil. Dentre as amostras rurais, 40 foram obtidas em comunidades ribeirinhas e 26 em comunidades indígenas, ambas ao longo do rio Purus. Durante a amostragem foi aplicado um questionário com informações sobre sexo, idade, viver em áreas secas ou alagadiças, acesso ou não às ruas (cães urbanos) e acesso à floresta. A presença de anticorpos contra Toxoplasma gondii, Neospora caninum, Leishmania infantum chagasi e Leishmania amazonensis foi detectada pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) com ponto de corte de, respectivamente, 16, 50, 40 e 40. Associação entre as variáveis qualitativas e a positividade para cada um dos parasitos foi avaliada pelo teste do χ2 (p < 0,05). A ocorrência de animais com anticorpos contra T. gondii, N. caninum e L. amazonensis foi de, respectivamente, 61,6%; 7,1% e 8,1%. Nenhuma amostra foi positiva para L. infantum chagasi. A variável viver em área urbana (p=0,041) apresentou associação com ocorrência de T. gondii e o número de cães positivos a T. gondii aumentou com a idade (p = 0,0006). A variável sexo (machos) apresentou associação com N. caninum (p = 0,018) e nenhuma variável apresentou associação com L. amazonensis. Os títulos de anticorpos contra T. gondii variaram de 64 a 32.768; contra N. caninum de 100 a 800 e contra L. amazonensis de 40 a 640. T. gondii e L. amazonensis são dois agentes de importantes zoonoses e encontram-se ativos na região. O município estudado, especialmente as comunidades ribeirinhas, possuem peculiaridades geográficas, sociais e ecológicas distintas e necessitam maior atenção das autoridades para o controle desses agentes.