A purified fraction of crystals stabilized with Cd2+ is prepared from Saccharomyces curlsbergensis protoplasts by means of differential centrifugation. As proved by negative staining the crystals are hexagonal with well preserved surface which in its turn also reveals a hexagonal fine structure.Crystals are digestible by pronase (1 mg/ml) in phosphate buffer (pH 7.4). The molecular weight of protein subunits is 38000 & 300 D. Amino acid composition of the crude crystal protein is similar to that of microtubular protein (MTP) from brain and sperm, except that lysin content is much higher. The crystal protein exhibits more differences, however, after purification by preparative gel electrophoresis. The level of glycine, alanine, and valine is increased, whereas that of glutamic acid is decreased.I n kompletten Zellen anaerober stationarer Kulturen von Saccharomyces cerevisiae treten Kristalle auf, die sich beimubergang zur Aerobie in ,,kurze Fasern" und weiter zu Mikrotubuli (MT) umwandeln (MOOR 1965(MOOR , 1066(MOOR , 1967). Bei S. carlsbergensis (MAY 1974) und 8. cerevisiae (TANAKA u. MIZUNAQA 1974) werden cyto-und karyoplasmatische Kristalle gefunden, wenn dieZellen in hypertonischen Salz-oder Zuckerlosungen inkubiert werden. Die Autoren nehmen an, darJ es sich bei diesen Aggregaten um mikrotubulares Protein (MTP) handelt. Gestutzt wird diese Vermutung durch den Nachweis kristall-assozierter karyoplasmatischer MT und durch die Moglichkeit der Induktion von mikrotubularen Kristallen inMausefibroblasten (KRISHAN u. HSU 1969) und Seeigeleiern (BRYAN 1972) durch Vinblastin. I n der vorliegenden Arbeit werden die in 8. carlsbergensis induzierten Kristalle isoliert und biochemisch charakterisiert. Ein Vergleich der hier gewonnen Ergebnisse rnit biochemischen Daten bereits charakterisierter mikrotubularer Proteine verschiedener Organsinien kann erste Hinweise ergeben, ob die Kristalle tatsachlich aus MTP bestehen. Diese Prage ist von Interesse, da Pilz-MTP bisher noch nicht isoliert werden konnte und das Auffinden 15 nm dicker Kristall-assozierter MT in Kiilte-behandelten Protoplasten (MAY 1974) darauf hindeutet, daB sich dieses Protein von der Mehrzahl der bisher aus eukaryontischen Zellen isolierten mikrotubularen Proteine in einigen Merkmalen unterscheidet. Material und Methoden Objekt und Kultivierung: Untersuchungsobjekt ist Saccharomyces curlsbergensk, Stamm H60. Die aerobe Anzucht der Hefezellen (vgl. MAY 1971) erfolgt in einem Niihrmedium nach OHNI~HI et al. (1966). Herstellung von Protoplasten: nach MAY (1974). Kristallisolierung (vgl. Abb. 1): 3,5 x lo8 Protoplasten werden nach Waschen mit 1,4 M Sorbitlosung in 5 ml 0,05 M Maleinsiiurepuffer, pH 7,l mit 10 mM CdCl, suspendiert (Abb. ll), in ein Kkltebad yon -20 "C getaucht und 60 sec lang mit einem Branson-Ultraschallgerat rnit Ultraschall behandelt. Das Homogenat (Abb. 111) wird mit 70 ml 0,05 M Maleinsilurepuffer, pH 7,l
