Measurements of DNA damage on silver stained comets using free Internet software

Comet Assay measurements: a perspective

“…Other dyes used are SYBR® green/gold (Tice et al 1998), AO, YOYO dye (Singh et al 1994) and propidium iodide. In addition, non-fluorescent staining, such as silver stain, has also been used by some workers (Kizilian et al 1999;Garcia et al 2007). …”

Genotoxicity Testing in Pesticide Safety Evaluation

“…This enables quantification of DNA in comet tails after staining with an appropriate fluorochrome (e.g. ethidium bromide) or with silver staining protocol (Garcia et al, 2007). The comets can be either classified by visual examination (visual scoring) (or measured from morphological parameters obtained by image analysis and integration of intensity profiles (Collins, 2004).…”

Desenvolvimento e validação de técnica quantitativa de análise de imagem para avaliação do teste do cometa corado pela prata

“…Coeficiente O baixo custo operacional, a relativa segurança dos reagentes, a possibilidade de armazenamento das lâminas e a equivalência dos resultados do teste do cometa comparados à técnica clássica com fluorescência são vantagens que fortalecem o emprego da coloração pela prata na execução do teste do cometa (12,20) . Uma limitação da coloração pela prata é a grande quantidade de resíduos escuros depositados sobre a lâmina, criando uma "sujeira" que dificulta o processo de filtragem e segmentação digital das estruturas e a avaliação convencional pelos softwares de análise de imagem (12) .…”

“…Uma limitação da coloração pela prata é a grande quantidade de resíduos escuros depositados sobre a lâmina, criando uma "sujeira" que dificulta o processo de filtragem e segmentação digital das estruturas e a avaliação convencional pelos softwares de análise de imagem (12) . Para superar essa dificuldade foram desenvolvidos algoritmos para filtrar as partículas não agrupadas aos cometas, que se mostraram eficazes para isolamento e segmentação das imagens dos cometas com relação ao fundo da lâmina.…”

“…Outra desvantagem da coloração fluorescente é a toxicidade de alguns reagentes, como o brometo de etídio, que é mutagênico e, sob exposição crônica, pode ser cancerígeno (20) . Quando comparadas, as duas colorações não diferem com relação aos resultados das imagens obtidas, sendo, portanto, equivalentes (12,20) .…”