Mechanisms of antitumor action of metal complexes of Ru(III), Cr(III), Rh(III) and Pt(II) on several cell lines including U2-OS cisplatin-sensitive/resistant cells

Abstract

ANALIZA MODALITETA CITOTOKSICNOG DELOVANJA KOMPLEKSA Nд BAZI PLATINE(II), RUTENIJUMA(III), HROMA(III) 1 RODIJUMA(III) ISPIТIVAN J EM Nд TUMORSKIM CELIJAMA U KU LTU RI ABSTRAKT Cjlj ove studjje Ьiо је jspjtjvanje potencjjala antjtumorskog dejstva kompleksa metala kao sto su rutenjjum(lll), hrom(lll) ј rodjjum(lll), sa Ьidentatnim f3-diketonato ligandima [(acac)-acetilacetonat ligand, (tfac)-trifluoroacetilacetonat ligand]. Takodje је poredjena aktivnosti ovih kompleksa sa aktivnoscu kompleksa platine cis-1 trans-izomera dipiridindihloroplatine(ll)(cis-/trans-[Pt(Py) 2 CI 2 ] , Py=piridjn) ј cjsplatjne. Antjproljferatjvna aktivnost kompleksa ispitivana је na panelu sest celijskjh ljnjja: А2780 , Hela, Jurkat, К652 , ukljucujucj cjsplatjna-sensjtjvne ј -rezistentne celije osteosarkoma (U2-0S and U2-0S/Pt). Uticaj unutarcelijskog glutationa (GSH) na citotoksicnu aktivnost ispitjvanjh kompleksa pracen је u kojnkubacjonoj studjjj sa butjoninsulfoksiminom (BSO). Protocna citometrija је upotreЬijena za ispjtjvanje apoptoze nakon Anexin V-FITC/PI bojenja kao i za ispjtivanje aktivnosti kaspaze-3. Apoptoza је dodatno pracena morfoloskom analizom celijske smrti na Hela celjjama nakon bojenja sa АО/ EtBr. Potencijal ispitivanjh agenasa da interaguju sa DNK analiziran је koriscenjem masene spektrometrije (ICP-MS), dok је inhjblcija sjnteze nukleinskih kiselina pracena na osnovu jnkorporacije radioaktivno oЬiezenih nukleotida 13 C-tjmidin 1 3 H-uridin u DNA 1 RNA. Antimetastatska aktivnost kompleksa pracena је na osnovu inhjblcjje aktjvnostj metaloproteinaza ММ Р-2 ј ММР-9 , pomocu ELISA kjta. Rezultatj studjje cjtotoksicnostj ukazuju da је aktivnost Ru(tfac) 3 jzrazena kao IC 50 vrednost, na celjjama osteosarkoma , cisplatina-senzjtjvnom soju (U2-0S) IC 50 = 39,25 ± 10,45 11М i cisplatina -rezistentnom soju (U2-0S/Pt) 37 ,75 ± 13,65 11М , priЬiizna aktivnostj na А2780 celijama. Citotoksicnost Ru(acac) 3 se krece u opsegu jznad 1 ОО 11М , dok kompleksi hroma ј rodjjuma nemaju antjtumorsku aktivnost. Trans-[Pt(Py) 2 CI 2 ]је pokazao antiproliferativnu aktivnost znacajno vecu u poredjenju sa cisizomerom i skoгo priЬiiznu cjsplatini na ispitivanim celijskim linijama. Analiza celijskog ciklusa i apoptoze otkriva da Ru(tfac) 3 jndukuje apoptozu na А2780 celijam a do 40% i uzrokuje zastoj u S fazj celjjskog ciklusa kao ј opadanje broja celija u G1 ј G2. Ru(acac) 3 takodje indukuje apoptozu do 10% na dvema celjjskim linijama А2780 (48 h dejstva) ј Hel a (72 h dejstva) mada је indukcija aktjvnosti kaspaze-3 (п а Hela) slaba u poredjenju sa cisplatjnom. Trans-[Pt(Py) 2 CI 2 ] poseduje kapacitet indukcije kaspaza-3-zavisne apoptoze, u stepenu slicnom cisplatinj i vecem od svog cis-izomera . lspitivanja jnterakcije ne-platinskih kompleksa sa DNK/RNK otkrjvaju da se jedino Cr(lll ) djrektno vezuje za DNK, dok derjvati Ru(lll) i Cr( l ll) , posebno Ru(tfac) 3 poseduju snazan potencijal inhiblcije sjnteze DNK ј RN K. Ru(acac) 3 pokazuje kapacjtet jnhjblcjje metaloprotejnaza ММ Р-2 i ММР -9. Na osnovu dobljenih rezultata , kompleksi ruteniju...