The streaked prochilod, Prochilodus lineatus, represents the most important fishery in the La Plata Basin (South America). Our objective was to analyze brackish environment use by the streaked prochilod captured from Paraná and Uruguay rivers. To accomplish this, lapillus otolith sections were analyzed for Sr:Ca with laser ablation-inductively coupled plasma-mass spectrometry (LA ICP-MS) to infer habitat use of fish. To the interpretation of transects, a threshold that represents the transition between freshwater and brackish environments was calculated using the Sr:Ca ratio of the otolith edge of specimens captured in the first section of the La Plata Estuary (salinity ≥ 0.5 PSU). The percentage of fish using the estuary was higher in the Paraná (37%) than the Uruguay River (5%). Change-point analysis showed that fish entered the estuary between 1 and 3 times throughout life at a wide range of ages (0-15 years). These incursions had no obvious periodicity. This information should be integrated into future management actions, which should also be specific to each area since migration patterns differ between the major rivers of the basin.Keywords: Connectivity, Freshwater resident, Laser ablation, River migration, Streaked prochilod.El sábalo, Prochilodus lineatus, representa la pesquería más importante en la Cuenca del Río de la Plata (Sudamérica). Nuestro objetivo fue analizar el uso del hábitat estuarino del sábalo proveniente de los ríos Uruguay y Paraná. Para esto, se analizó la relación Sr:Ca en secciones de otolitos lapilli por ablación láser acoplada a espectrometría de masas con fuente de plasma de acoplamiento inductivo (LA ICP-MS) para inferir el uso de hábitat. Para interpretar las transectas, un umbral que representa la transición entre los ambientes de agua dulce y estuarino, fue calculado usando la relación Sr:Ca del borde del otolito de especímenes capturados en la primera sección del estuario del Plata (salinidad ≥0.5 UPS). El porcentaje de peces que usaron el estuario fue más elevado para el Paraná (37%) en relación al Uruguay (5%). El análisis de cambio puntual mostro que los individuos ingresan al estuario entre 1 a 3 veces a lo largo de la vida en un amplio rango de edades (0-15 años). Las incursiones no mostraron una periodicidad notoria. Esta información debería integrarse a futuras acciones de manejo que deberían ser específicas para cada área considerando los patrones de migración que difieren entre los grandes ríos de la Cuenca.Palabras clave: Ablación laser, Agua dulce residente, Conectividad, Migración de rio, Sábalo.