Microbial hydroxylation of steroids. Part 12. Hydroxylation of testosterone and related steroids by Gnomoniafructicola ATCC 11430

Abstract

The fungus Gnomonia fructicola ATCC 11430 hydroxylates testosterone at C-2P in 40-60% yield. The enzyme involved has been shown to be an inducible CO sensitive, cyanide insensitive oxygenase, with a requirement for theA4-3-ketosteroid substrate functionality. The use of 2a-and 2P-deuterium labelled substrates has shown that hydrogen loss from C-2 during 2P hydroxylation is isotope dependent and non-stereospecific. This is interpreted in terms of a A',4-dienolic enzyme-bound intermediate form of the substrate. Le champignon Gnomonia fructicola ATCC 1 1430 provoque une hydroxylation en position C-2P de la testosterone, avec un rendement de 40-60%. On a dkmontrk que l'enzyme implique une oxygknase qui peut &tre induite, qui est sensible au CO et insensible au cyanure et dont le substrat doit contenir une fonctionnalitk A4-&to-3 stkro'ide. Utilisant des substrats marquks au deutkrium dans les positions 2 a et 2P, on a pu demontrer que l'hydroxylation depend de l'isotope et qu'elle n'est pas spicifique.On peut interpreter ce resultat, en suggkrant que le substrat est lie i l'enzyme par le biais d'une forme intermediaire A2.4-diCnolique.