Multiple Formen der NADPH-abhängigen Glutathion-Reduktase im Serum. Untersuchungen über die NADPH-abhängige Glutathion-Reduktase im Serum, II. Mitteilung

Abstract

Zusammenfassung: Seren mit erhöhter Glutathion-Reduktase-Aktivität wurden gelelektrophoretisch in Agar bzw. Polyacrylamid sowie mittels Gelfiltration untersucht. Beide Trennverfahren ergaben, daß sich die Glutathion-Reduktase-Aktivität in den einzelnen Proben auf bis zu 3 nach Wanderungsgeschwindigkeit und Molekülgröße unterschiedliche Fraktionen verteilt-Dabei entsprechen die Fraktionen mit dem kleinsten bzw. größten Molekulargewicht den am langsamsten bzw. am schnellsten wandernden Banden in der Agarelektrophorese. Vorinkubation der Serumproben mit FAD bzW. Neuraminidase hat keinen Einfluß auf die Wanderungsgeschwindigkeiten der 3 Fraktionen. Nach Zusatz von j3-Mercaptoethanol zum Serum findet man bei der Gelelektrophorese und der Gelfiltration nur noch die GlutathionReduktase-Fraktion mit der langsamsten Wanderungsgeschwindigkeit und dem niedrigsten Molekulargewicht (140 000). Nach Entfernung des Thiols werden die beiden anderen Glutathion-Reduktase-Fraktionen wieder nachweisbar. Weitere UiltefBuchungen an den nach Agargelelektrophorese isolierten Glutathion-Reduktase-Fraktionen zeigen, daß es sich bei den 3 Fraktionen der Glutathion-Reduktase im Serum um oligomere Formen des Enzyms handelt, die reversibel ineinander übergehen bzw. überführt werden können. Multiple forms of NADPH-dependent glutäthione reductase in serum. Studies on the NADPH-dependent glutathionereductase in serum II.Summary: Sera with elevated activities of glutäthione reductase were investigated by gel electrophoresis in agar or polyacrylamide, and by gel filtration. In both separation methods the glutäthione reductase activity in individual samples was resolved, showing up to three fractions differing in rate of migration and molecular size. The fractions with the lowest and highest molecular weight, corresponded respectively to the slowest and fastest migrating bands in agar gel electrophoresis. Preincubation of the serum samples with FAD or neuraminidase had no effect on the rate of migration of the three fractions. After the addition of ß-mercaptoethanol to the serum, gel electrophoresis and gel filtration showed only the enzyme fraction with the slowest rate of migration and the lowest molecular weight (140jOOO), The other two fractions reappeared after removal of the thiol from the serum. Further studies on the isolated (agar gel electrophoresis) fractions showed the existence of oligomeric forms of the enzyme, which are reversibly interconvertible. Einführung