Nachweis und Charakterisierung einer konstitutiven Lävansucrase und einer epigenetisch regulierten Saccharase in Pseudomonas syringae pv. phaseolicola

Abstract

Pseudomonas syringae pv. phaseolicola, a plant pathogenic pseudomonad, possesses two sucrose-splitting enzymes, a levansucrase and a sucrase. The levansucrase is found both extracellularly and intracellularly, and enzyme synthesis is independent of the carbon source. In addition to levansucrase, cells grown on sucrose contain a sucrase. The two sucrose-splitting enzymes differ in their optimum pH value and optimum temperature as well as in their substrate specificities.

Purification and characterization of an extracellular levansucrase from Pseudomonas syringae pv. phaseolicola

“…phaseolicola pointed to an involvement of lipopolysaccharides or membrane particles in stabilizing the enzyme in solution (25). Substrate, inhibitor, and acceptor specifities differ widely in levansucrases from different species (5,6,15,21,23,29,30,34,41,46). In B. subtilis levansucrase, an aspartyl residue was detected as the substrate-binding amino acid (4).…”

“…The levansucrases described until now differ widely in characteristic properties, e.g., molecular weight, donor, acceptor, and inhibitor specificity. In contrast to the heterogeneity within the whole group of levansucrases, the enzymes of the gram-negative bacteria are similar in important aspects such as constitutive production, molecular weight, and, as far as is known, amino acid sequence (5,13,41,44). In plant-pathogenic bacteria, the enzyme may play a role in pathogenesis (12,20).…”

Untersuchungen über das Vorkommen von Lävansucrase und Saccharase bei Pathovarietäten von Pseudomonas syringae und eng verwandten nicht phytopathogenen Pseudomonaden

“…phuseolicola (P. phuseolicola) verfugt uber zwei saccharosespaltende Enzyme, eine konstitutive, sowohl extra-als auch intrazellular lokalisierte Lavansucrase und eine nur nach Wachstum auf Saccharose gebildete und intrazellular vorliegende Saccharase (SAUERSTEIN und REUTER 1988 Die Kultivierung erfolgte in 500-ml-Rundkolben, die mit 100 ml Nahrlosung beschickt waren, auf Reziprokschiittelmaschinen bei einer Kulturtemperatur von 25 "C. Die Nahrlosung war wie folgt zusammengesetzt: Glycerol oder Saccharose 5.0 g, NH,CI 2,O g, Na,HPO, 5,5 g, KH,PO, 2,6 g, Na,SO, I,0 g, FeSO, 0,Ol g. MnSO, 0.01 g und Hefeextrakt (DIFCO) 1,0 g pro 1 aqua dest. Nach Erreichen der stationaren Wachstumsphase wurden die Kulturen abgebrochen und durch Zentrifugation bei 7000 g (10 min) die Nihrlosungsiiberstande (NL) und die Zellsedimente gewonnen.…”

“…Der phytopathogene Pseudomonad Pseudomonus syringae pv. phuseolicola (P. phuseolicola) verfugt uber zwei saccharosespaltende Enzyme, eine konstitutive, sowohl extra-als auch intrazellular lokalisierte Lavansucrase und eine nur nach Wachstum auf Saccharose gebildete und intrazellular vorliegende Saccharase (SAUERSTEIN und REUTER 1988). Die Lavansucrase katalysiert auch die Synthese des Polyfructans Lavan.…”