Neurochemical mechanisms of the cerebroprotective action of spiro[indole-3,1'-pyrrol [3,4-с] pyrrol] derivative

Abstract

РезюмеНа срезах гиппокампа крыс исследованы по влиянию на амплитуду постсинаптических потенциалов пирамид-ных нейронов механизмы нейропротекторного эффекта производного спиро [индол-3,1'-пиррол[3,4-с] пиррола] (шифр R-86). In vitro R-86 ослабляет ответы на акти-вацию НМДА-рецепторов и повреждение ВВеденИеПоиск новых препаратов, обладающих достаточ-но высокой терапевтической активностью при по-вреждениях головного мозга, является актуальной задачей в связи с широким распространением сосу-дистых заболеваний, ведущих к нарушениям мозго-вого кровообращения. Наиболее часто встречается ишемический инсульт [4]. В доклинических иссле-дованиях у одного из производных спиро [индол-3,1'-, синтезиро-ванного в Национальном фармацевтическом уни-верситете к. фарм. н. Р. Г. Редькиным, выявлена достаточно высокая антигипоксическая и антиише-мическая активность, а также способность умень-шать неврологический дефицит у животных в усло-виях модельного ишемического инсульта в дозе 10 мг/кг [2, 3]. Достаточно полно исследованы ме-ханизмы нейропротекторого действия указанного вещества главным образом на системном уровне. Клеточные и субклеточные аспекты механизма дей-ствия фармакологического вещества R-86 изучены недостаточно. С целью их выяснения в настоящей работе предпринята попытка выяснить влияние вещества R-86 на популяционные возбуждающие постсинаптические потенциалы пирамидных ней-ронов (пВПСП) области СА1 гиппокампа крыс, об-ладающих высокой чувствительностью к гипоксии, при повреждениях срезов мозга, вызываемых экс-айтотоксическим влиянием N-метил-D-аспартата (НМДА), аноксии с нейрогликопенией, оксидативно-го стресса и дексаметазона. метОдИКАЭлектрофизиологические исследования выпол-нены на срезах дорсального гиппокампа. Детали ме-тода изложены ранее [1]. Крыс наркотизировали кетамином (50 мг/кг внутрибрюшинно). По достиже-нию наркоза животных декапитировали, из черепа извлекали головной мозг, который охлаждали рас-твором для препарирования, имеющим температу-ру 4-6 °C. Выделяли дорсальный гиппокамп. Срезы толщиной 400 мкм готовили с помощью вибратома в ванночке, заполненной охлажденным раствором для препарирования. Далее из поперечных срезов мозга выделяли гиппокамп; срезы указанной струк-туры помещали в инкубационную камеру, где их пер-фузировали раствором Кребса следующего ионного состава (в мМ): NaCl -124, KCl -3; KН 2 PO 4 -1,25; NaHCO 3 -26, CaCl 2 -2, MgSO 4 -1, глюкоза -10. К раствору добавляли диметилсульфоксид (ДМСО) в виде 0,1%-го раствора из расчета 0,5 мл на 50 мл, что обеспечивало растворимость вещества R-86.Раствор Кребса в инкубационной камере по-стоянно насыщали карбогеном, поддерживали температуру 25 °C, скорость протока 2 мл/мин. Че-рез 90 мин инкубации один из срезов помещали в рабочую камеру объёмом 0,5 мл, где перфузирова-ли насыщенным карбогеном раствором Кребса при температуре 28 °C со скоростью 2 мл/мин. В срезах гиппокампа регистрировали пВПСП пирамидных нейронов области СА1, вызываемые электрической стимуляцией коллатералей Шаффера. Стимуляцию синаптических входов осуществляли с помощью би-полярно...