Neste trabalho é descrito um procedimento automático em fluxo, para a determinação de L-alanina em meio de síntese. O método é baseado na oxidação do aminoácido pela L-aminoacido oxidise, seguida da detecção do H 2 O 2 formado, pela reação de quimiluminescência com o luminol. Para condicionamento da amostra, como diluição e ajuste do pH, foi utilizada a estratégia da reamostragem. Pelo procedimento foi possível a determinação de L-alanina na faixa de 0,5 a 25,0 mmol L -1 , com um limite de detecção de 0,08 mmol L -1 e um coeficiente de variação menor que 4% (n = 10). Outras características vantajosas foram uma freqüência analítica de 44 determinações por hora e um baixo consumo de reagente: 0,2 mg de luminol e 16,4 mg de hexacinoferrato(III) por determinação.In this work an automatic flow procedure for L-alanine determination in the synthesis medium without a prior sample treatment is described. The method was based on oxidation of L-alanine by L-amino acid oxidize followed by the reaction of the H 2 O 2 with luminol and chemiluminescence detection. In order to overcome the severe alkaline condition of the synthesis medium, a zone sampling strategy was employed for automatic sample dilution and pH adjustment. The procedure allows L-alanine determination in the range of 0.5 to 25.0 mmol L -1 , a limit of detection of 0.08 mmol L -1 and a variation coefficient lower than 4% (n = 10). Other advantageous feature such as a sampling throughput of 44 determination per hour and low reagent consumption, 0.2 mg luminol and 16.4 mg hexacinoferrate(III) per determination, respectively, were also achieved.